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变性指数文献资料
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一种神经元轴突变性的量化分析方法
目的 建立一种神经元轴突变性的量化分析方法.方法 采用Aβ25-35(10-7、10-6、10-5 mol/L)诱导的大鼠原代海马神经元轴突变性模型,经神经元特异性标记蛋白βⅢTubulin免疫荧光染色获得神经元形态学荧光图像.荧光图像经二维消卷积和二元化处理,将荧光标记的神经元区域转变为黑色并测量其面积,即为神经元总面积.应用ImageJ软件的颗粒分析功能测量轴突变性产生的片段和颗粒面积,并计算其占神经元总面积的百分比,即可获得神经元轴突变性的量化数据,命名为变性指数(degeneration index,DI).Western blot测定突触后致密蛋白95(postsynaptic density 95,PSD95)和突触素(synaptophysin,SYN)蛋白变化.Pearson法分析DI与PSD95、SYN变化的相关性.结果 免疫荧光染色结果显示Aβ25-35可诱导海马神经元轴突变性,DI显著高于对照组并呈剂量依赖性,PSD95和SYN蛋白水平显著降低,与DI变化呈显著正相关.结论 本方法可获得准确的神经元轴突变性的量化数据.