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  • SapM诱导的自噬体-溶酶体融合阻断依赖于SapM和Rab7的相互作用

    作者:胡东;王婉;赵润鹏;徐雪维;邢应如;倪升发;徐从景;铁保贤;张荣波

    目的 研究Rab7在结核分枝杆菌毒力因子分泌性酸性磷酸酶(SapM)诱导的自噬体-溶酶体融合阻断中的作用.方法 采用Rab7小干扰RNA(siRab7)转染Raw264.7细胞,Western blot法检测P62蛋白水平.mCherry-SapM转染Raw264.7细胞后免疫荧光检测SapM与Rab7共定位情况,免疫共沉淀分析SapM与Rab7的关系.用3种SapM的突变体SapM △ARCA,SapM△FRED和SapM △CT转染Raw264.7细胞,分析SapM的不同突变体与Rab7的关系.结果 siRab7处理后,细胞P62水平显著增高;免疫组织化学染色结果显示SapM与Rab7在胞内共定位;免疫共沉淀分析显示SapM与Rab7可相互沉淀;3种不同突变形式的SapM中,只有SapM△CT不能与Rab7相互作用.结论 SapM诱导的自噬体-溶酶体融合阻断依赖于SapM与Rab7的相互作用.

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