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  • 过表达人tRNA甲基转移酶9样蛋白KIAA1456抑制HO8910PM细胞增殖

    作者:陈怀梅;王佳;张应凤;高燕洪

    目的 研究人tRNA甲基转移酶9样蛋白KIAA1456的高表达对HO8910PM细胞增殖及细胞周期的影响.方法 利用PCR扩增KIAA1456编码区片段,克隆插入载体Ubi-MCS-EGFP-IRES-puromycin中,构建Ubi-KIAA1456-EGFP-puromycin (LV-KIAA1456)慢病毒表达载体;将慢病毒表达载体包装生成慢病毒颗粒并感染HO8910PM细胞,72 h后观察绿色荧光蛋白(GFP)在HO8910PM卵巢癌细胞中的表达分布情况;反转录PCR检测HO8910PM细胞中KIAA1456 mRNA水平,Western blot法检测HO8910PM细胞KIAA1456蛋白表达水平;CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期.结果 成功构建重组慢病毒表达载体LV-KIAA1456,慢病毒颗粒感染HO8910PM细胞后,细胞中KIAA1456的mRNA和蛋白均高表达.过表达KIAA1456的HO8910PM细胞增殖能力明显抑制、G1期细胞明显增加.结论 过表达KIAA1456显著抑制HO8910PM卵巢癌细胞增殖,细胞周期阻滞于G1期.

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