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Sirtuin 3减少心肌细胞钙超载时细胞色素C的释放并抑制细胞凋亡
目的 研究Sirtuin 3在心肌细胞钙超载时对细胞色素C(CytC)释放和caspase-3激活的影响.方法 将培养的H9c2心肌细胞随机分为4组,即对照组、Sirtuin 3组、离子霉素组(ionomycin组)和离子霉素联合Sirtuin 3组(ionomycin联合Sirtuin 3组).采用ionomycin诱导法构建心肌细胞钙超载模型,Western blot法检测心肌细胞线粒体及胞质细胞色素C(CytC)和caspase-3的水平,分光光度法检测caspase-3的活性,Annexin Ⅴ-FITC/PI双染色结合流式细胞术检测H9c2心肌细胞的凋亡比率.结果 成功构建钙超载模型.Western blot结果显示CytC在线粒体中的水平ionomycin组明显低于对照组,ionomycin联合Sirtuin 3组明显高于ionomycin组,CytC在胞质中的水平相反;Ionomycin组caspase-3的水平明显高于对照组,ionomycin联合Sirtuin 3组caspase-3的水平明显低于ionomycin组.分光光度法结果显示caspase-3的活性ionomycin组明显高于对照组,ionomycin联合Sirtuin 3组明显低于ionomycin组.双染色结合流式细胞术结果显示ionomycin组的凋亡比率明显高于对照组,ionomycin联合Sirtuin 3组的凋亡比率明显低于ionomycin组.结论 心肌细胞钙超载时,Sirtuin 3通过减少CytC释放和caspase-3的激活,抑制细胞凋亡.