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  • 氧气葡萄糖剥夺诱导原代培养的星形胶质细胞释放谷氨酸

    作者:刘伟;江山;刘毅;潘华将;陈雷;肖建新

    目的 观察氧气葡萄糖剥夺(OGD)对原代培养的星形胶质细胞谷氨酸释放的影响,并探讨其释放机制.方法 原代培养SD大鼠海马区星形胶质细胞,将其分为OGD组和对照组.OGD组的细胞置于不含糖和氧的培养基,37℃,950 mL/L N2和50 mL/L CO2,饱和湿度的培养环境下培养,而对照组细胞则正常培养.缺糖缺氧刺激时长分别为0、15、30、60、90、120 min,采用高效液相色谱,测定细胞外液的谷氨酸浓度.分别选用连接子蛋白43(Cx43)特异性反义寡核苷酸(Cx43-ASODN)和Cx43半通道的阻断剂Gap26预处理星形胶质细胞,采用高效液相色谱,测定细胞外液谷氨酸浓度,观察OGD对其谷氨酸释放的影响.结果 与对照组相比较,OGD刺激后,细胞外液谷氨酸浓度升高,并在刺激90 min后,达到峰值,为(5.00±0.30) nmol/mL,显著高于对照组的(2.36±0.15)nmol/mL(P <0.05);而OGD条件下,Cx43-ASODN或Cx43半通道阻断剂均可抑制细胞外液谷氨酸浓度的升高,刺激90 min后,细胞外液谷氨酸浓度分别为(4.02±0.18) nmol/mL和(3.93±0.32) nmol/mL,显著低于单纯OGD刺激组(P<0.05).结论 OGD可以诱导星形胶质细胞通过Cx43半通道释放谷氨酸.

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