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血清型2型猪链球菌文献资料
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血清型2型猪链球菌烯醇化酶参与猪链球菌抗吞噬作用
目的 制备高纯度的猪链球菌烯醇化酶(SsEno)重组蛋白并通过抗体封闭实验评价SsEno对猪链球菌抗吞噬能力的影响,鉴定其与人纤维蛋白原(hFg)结合的活性.方法 构建hisSsEno重组表达质粒,将其转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达后,通过SDS-PAGE分析蛋白表达情况,镍柱亲和纯化目的蛋白并用Western blot法进行验证.用hisSsEno免疫兔制备其高滴度的抗血清并通过人全血杀伤模型评价Eno对猪链球菌抗吞噬能力的影响.采用ELISA和Far-Western blot法鉴定hisSsEno与hFg结合活性.结果 成功构建了His标签蛋白原核表达质粒并获得了高纯度的hisSsEno重组表达蛋白.SsEno免疫的抗血清能显著降低强致病的猪链球菌05ZYH33在人全血中的存活能力.hisSsEno能特异地与hFg结合.结论 获得了hisSsEno重组表达蛋白,通过抗体阻封和全血杀伤模型发现SsEno是猪链球菌潜在的抗吞噬因子,且hisSsEno能特异性结合hFg.
