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  • 重构型人caspase-8基因的表达及其对HeLa细胞生长的影响

    作者:桂俊豪;贾林涛;许彦鸣;金明;于翠娟;赵晶;王智;张淼丽;王成济;杨安钢

    目的克隆人caspase-8催化结构域基因片段,并将其改建成2种大、小亚基基因次序颠倒的重构型人caspase-8基因,转染HeLa细胞,观察重构型人caspase-8基因的表达及其对HeLa细胞生长的影响.方法用RT-PCR法,克隆人caspase-8催化结构域基因片段,经重组PCR改造,构建大、小亚基基因次序颠倒的重构型人caspase-8基因.将其克隆入绿色荧光蛋白(GFP)真核表达载体pIRES2-EGFP,转染HeLa细胞,用荧光显微镜和倒置显微镜镜观察细胞的形态和结构.结果用RT-PCR法,成功地克隆了人caspase-8催化结构域基因片段,构建了3种重构型人caspase-8基因及其真核表达载体.转染HeLa细胞后,重构型人caspase-8基因的表达可导致HeLa细胞死亡.结论重构型人caspase-8基因在HeLa细胞中的表达可以有效地引起HeLa细胞死亡.

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