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重组人β干扰素1a文献资料
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重组人β干扰素1a(rhIFN-β1a)单克隆抗体的制备
目的 制备抗重组人β干扰素1a(rhIFN-β1a)单克隆抗体(mAb).方法 用纯化的rhIFN-β1a免疫BALB/c小鼠.取血清抗rhIFN-β1a滴度高的小鼠的脾淋巴细胞与小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞进行融合.经HAT筛选、有限稀释及阳性选择步骤获得稳定的杂交瘤细胞株.通过ELISA结果计算抗体的平衡解离常数(KD)并比较,选取KD好的1株细胞通过生物反应器进行罐培养,含有抗体的培养液经超滤和蛋白G凝胶亲和层析进行纯化.结果 通过融合筛选过程获得了13株稳定分泌抗rhIFN-β1a mAb的杂交瘤细胞株.KD为4.6×10-9 mol/L的1E8细胞株经培养后其上清抗体滴度可达1∶5000,经过2步纯化获得了纯度可达90％的抗体.结论 成功制备了纯度较高的rhIFN-β1a mAb.
