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  • 抗吗啡疫苗抗体的制备及其特性鉴定

    作者:马丽霞;周起;郑海波;李生斌

    目的:制备高效价的抗吗啡疫苗的抗体,并对其特性进行鉴定.方法:将人工合成的6-琥珀酰吗啡(M-6-S)与BSA在pH 9.0碳酸盐缓冲液中交联成M-6-S-BSA.经凝胶柱过滤和硫酸铵法纯化后,用两种不同方案免疫BALB/c小鼠和SD大鼠,用ELISA法和中和抑制试验分别测定抗体的滴度和进行特异性鉴定;用辐射热甩尾(TF)反射试验检测M-6-S-BSA疫苗的免疫效果.结果:用合成的M-6-S-BSA疫苗连续免疫小鼠8次,所获抗血清的效价可达1:200 000,大鼠免疫4次后抗血清的效价超过1:20 000.中和抑制试验表明,抗M-6-S抗体对吗啡和与吗啡有共同母环结构的6-单乙酰吗啡、海洛因及可待因具有较高的特异性.免疫大鼠腹腔注射2 mg/kg的吗啡后,其甩尾(TF)反射受到明显抑制,大效应百分率(%MPE)减少了74.7%,TF潜伏期回到基线水平的时间明显快于对照组.结论:成功地制备M-6-S-BSA疫苗,用其免疫小鼠和大鼠均可产生高滴度和特异性抗吗啡抗体.该抗体可明显减低大鼠对吗啡的抗伤害感受,为进一步研究吗啡疫苗抗体对抗吗啡的成瘾作用奠定了基础.

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