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递归PCR文献资料
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人 IgG3上游铰链区 /p53四价功能域融合基因的构建及空间构象分析
目的构建人 IgG3上游铰链区 /p53四价功能域融合基因，并进行空间构象的分析。方法利用递归 PCR法，扩增人 IgG3上游铰链区 /p53四价功能域融合基因，并在融合基因 5′端和 3′端引入 Sal I与 Hind Ⅲ酶切位点。将融合基因克隆入 pUC19载体中，经酶切鉴定及序列测定证实后，利用计算机软件进行空间构象分析。结果人 IgG3上游铰链区 /p53四价功能域融合基因，经酶切鉴定及测序证实，其大小及核苷酸序列正确，与设计完全一致。计算机软件分析显示，融合基因表达产物可自动装配成四聚体，并具有 4条柔性好的长多肽，可确保与其融合的其他基因片段空间构象的独立性。结论人 IgG3上游铰链区 /p53四价功能域融合基因的成功构建，为进一步研制多价抗体奠定了基础。
