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生物素-亲和素酶联免疫吸附法文献资料
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人血清癌胚抗原的生物素-亲和素ELISA检测方法的建立
[目的]建立检测血清癌胚抗原(CEA)的高灵敏度生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法.[方法]亲和层析纯化得到CEA,免疫新西兰家兔制备多克隆抗体.将得到的抗体连接生物素和辣根过氧化物酶,在生物素化BSA包被的96微孔板上建立生物素-亲和素ELISA( BA-ELISA).对这一体系的线性、灵敏度、特异度、稳定性、回收率等参数进行鉴定,并和常规ELISA、放射免疫检测以及化学发光法相比较检测了临床标本中的CEA浓度.[结果]线性检测范围为(0.42 ～ 50)U/mL,检测结果表明,体系稳定性良好；灵敏度为0.42 U/mL,批内、批间差异均小于10.0％.该研究建立的方法与常规ELISA对比差异有统计学意义,与放射免疫检测对比差别无统计学意义.与化学发光法相比较,回归方程为y=0.04825+0.99674x,r=0.994,差异无统计学意义.[结论]建立的CEA的BA-ELISA检测方法易于操作、灵敏度高、价格低廉,适合应用于临床检测.
关键词： 癌胚抗原 乳腺癌 生物素-亲和素酶联免疫吸附法 生物素 亲和素
