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G0/G1阻滞文献资料
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人肾小管上皮细胞血清饥饿法同步化方法的研究
目的:探讨采用血清饥饿法建立将人肾小管上皮细胞(HKC)的同步化方法.方法:将HKC分为6个不同低血清浓度组及对照组, 分别采用胎牛血清浓度为0、 1、 2、 3、 4、 5和100 mL/L的DMEM培养液培养24 h.根据流式细胞术结果选择的佳同步化HKC的胎牛血清浓度.将HKC的同步化处理时间分别延长为24 h、 48 h和72 h, 选择佳同步化时间.用MTT法绘制生长曲线观察血清饥饿处理对HKC生长的影响.采用免疫细胞化学方法验证血清饥饿同步化处理HKC的效果.结果:选择无血清(0 mL/L)和1 mL/L为HKC佳同步化的胎牛血清浓度, 选择48 h为HKC同步化佳时间.细胞生长曲线表明采用1 mL/L胎牛血清的DMEM培养液培养48 h后恢复正常培养的HKC细胞, 其生长曲线更接近于正常培养的细胞.Brdu进一步证明, 用1 mL/L胎牛血清的DMEM培养液培养48 h可以使90%以上的HKC细胞处于G0/G1期.结论:用1 mL/L胎牛血清的DMEM培养液培养48 h可获得90%以上的G0/G1期HKC.
