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  • 骨髓涂片常规检验的基本实践和体会

    作者:李早荣;徐胜;刘鹏

    目的 根据多年的实践和体会采用全新的概念,对确诊血液病及其疗效、预后和骨髓移植造血功能的恢复判断具有重要意义的骨髓涂片常规检验作了开拓性探索,使该项检验能为临床提供更准确可靠、更直观定量和更新更多的信息.方法 采用理论与实践、经验与体会、具体方法与实验数椐相比较的手段.结果 骨髓液取材部位以髂后上棘为好;骨髓液取材量以真正抽到骨髓液、满足检验的需要为原则,以往规定以0.2 ml左右为佳,而根据作者抽取不同骨髓液量的三组标本统计,抽取0.04~0.20 ml组、0.2~1.00 ml组及1.00~3.00 ml组比较,三组有核细胞定量计数,均值分别为67.6,94.6和119.4,A组与B组,A组与C组均值间差异有显著性意义.所以抽取骨髓液的量以0.5~1.0 ml(0.5 ml左右)为佳;为了涂到数量足够、细胞分布均匀的涂片,提出以EDTA-K2抗凝骨髓液(2~4 mg/ ml);以定量(5 μl)抗凝骨髓液涂成2 cm×3.5 cm能区别头、体、尾的簿片,这样既比较规范又可对巨核细胞进行定量计数,根据38份骨髓液涂片标本实验,采用单位面积法、每张涂片法和定量计数法比较,其变异系数(CV%)分别为65.8,27.6和26.4,显然,定量计数法好;采用批量(每次50~100张)垂直染色可使涂片之间染色结果相对一致,还可避免沉渣附着影响镜下观察;用血细胞计数池直接计数抗凝骨髓液内的有核细胞,高、中、低值标本结果变异系数(CV)分别可达到6.1,6.1和9.6,准确性和重复性十分理想,大大提高了对骨髓增生程度判断的准确性和重复性,而且便于动态观察和回顾性比较;以往采用低倍镜或油镜视野计数成熟红细胞与有核细胞数的比例来判断骨髓增生程度,重复性和准确性差,而且各种型号显微镜的视野面积也有很大的差异. 结论 文中提出了一些全新的观点,例如:骨髓液的抗凝,定量涂片,批量垂直染色,骨髓有核细胞定量计数和巨核细胞定量计数,各型显微镜视野面积不同等,具有很强的实用性和针对性.

  • 骨髓巨核细胞和有核细胞计数的实验报告

    作者:李早荣;胡锡林;周巧慧;寿爽;王晓君

    目的为了给确诊血液病及观察其疗效、预后,或判断骨髓移植造血功能恢复提供具有重要意义的骨髓巨核细胞数和有核细胞数定量数据,使该二项检验能为临床提供更准确、重复性更好的信息.方法 采用抗凝骨髓液、定量骨髓涂片、检查全涂片的巨核细胞以达到定量计数巨核细胞,并以传统每张涂片法作对照;以20倍稀释后用血细胞计数池计数的方法,达到定量计数骨髓有核细胞.结果传统的每张涂片法38张涂片计数结果巨核细胞为299.97±197.27个/张(x±s),变异系数为65.8%;新推荐的骨髓巨核细胞定量计数法34张涂片结果为64.72±17.09/μl(x±s),变异系数为26.4%.114例骨髓有核细胞定量计数结果介于(6.0~456.0)×109/L之间((x97.3×109/L);三份骨髓有核细胞高、中、低值标本反复分别定量计数30次,变异系数分别为6.1%,6.1%和9.8%.结论该研究推荐的骨髓巨核细胞和骨髓有核细胞定量计数法,与传统的每张涂片法或成熟红细胞与有核细胞比值及低倍镜估计法比较,具有方法学设计科学合理、重复性好,可提供具体而确切的数据,便于临床动态分析比较;同时还根据定量计数有核细胞的骨髓涂片,提出了一个高倍镜判断有核细胞增生程度的标准,可供必要时选用.

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