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干细胞技术与牙齿再生的研究进展
牙齿是一个复杂的生物器官,由多种组织组成,包括牙釉质、牙本质、牙骨质和牙髓,牙齿脱落是常见的器官衰竭[1]。牙齿及其支持组织是由上下颌突和额鼻突的外胚层及外胚间叶细胞发育而来,其发育是一个长期、复杂的生物学过程,包括细胞与细胞、上皮与间充质的相互作用,细胞分化,形态发生,组织矿化和牙齿的萌出,而牙胚的分化和发育过程是依赖于特定牙齿发生部位的上皮组织及其下方的间充质组织相互作用而形成的,故对于再生的牙齿来说,其发育至少需要两种细胞,即牙源性上皮细胞及牙源性间充质细胞,而牙齿再生研究的方向多半是寻找这两种细胞的替代物。
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用人牙源性上皮和间充质细胞构建组织工程化牙齿样结构的实验研究
目的:以人牙源性上皮和间充质细胞作为种子细胞在裸鼠体内构建牙齿样结构.方法:将体外培养的人牙源性上皮细胞和经生长因子诱导后的牙源性间充质细胞分层接种于经塑形的陶瓷化骨或Collagraft三维支架上,将形成的细胞/支架复合物移植到免疫缺陷小鼠的皮下,建立牙源性上皮细胞复合间充质细胞的体内立体培养模型.14~18周后取材,采用HE染色、改良丽春红三色法、免疫组化和原位杂交方法检测移植物中的组织新生情况.结果:细胞在三维支架上形成了包含釉质样组织和牙本质牙髓复合体的牙齿样结构.新生的釉质样组织表达人成釉蛋白,其周围残留的牙源性上皮细胞表达人釉原蛋白mRNA.同时,人DSP蛋白在牙本质样组织中呈阳性表达.所有对照组标本中均未观察到该现象.结论:以优选出并经塑形的三维支架为载体,在裸鼠体内建立牙源性上皮细胞复合间充质细胞的立体培养模型,成功构建出组织工程化牙齿样结构.