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siRNA 慢病毒载体文献资料
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肺腺癌细胞 S100A6基因 siRNA 慢病毒载体构建及鉴定
目的：构建肺腺癌细胞 S100A6基因 siRNA 慢病毒载体并鉴定。方法：慢病毒载体（pLenR －GPH）构建靶向 S100A6基因的 RNA 干扰重组体，用以建立 S100A6基因稳定沉默的肺腺癌 A549细胞株。结果：PCR 鉴定结果显示3个扩增的阳性片段均已插入 pLenR －GPH 载体，测序结果证实三个重组慢病毒载体SH1、SH2、SH3的插入序列完全正确，重组慢病毒载体转染到293T 细胞中包装成病毒颗粒，将其感染肺癌A549细胞后，RT －PCR 和 Western blot 检测结果均证实三组重组体感染的细胞内 S100A6 mRNA 和蛋白的表达受到不同程度的抑制，沉默效率分别为98．29％、84．05％及78．24％。结论：成功构建了 S100A6基因 RNAi慢病毒重组载体，并建立了其稳定表达的肺腺癌 A549细胞株，为探讨 S100A6基因对肺腺癌生物学行为的影响提供了可靠的细胞模型。
