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MIA基因文献资料
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MIA基因-RNAi对人黑素瘤A375细胞增殖的影响
目的 探讨RNA干扰技术抑制恶性黑素瘤细胞株A375 MIA基因表达后,对A375细胞增殖的影响.方法 构建针对人黑素瘤A375细胞(MIA)基因3个不同靶序列的RNAi真核表达载体pLTE-hMIA-RNAi,用磷酸钙细胞转染法把构建的载体分别转染HEK293细胞,采用Western技术和RT-PCR技术分别检测MIA基因蛋白的表达和mRNA水平.选择对MIA基因表达抑制作用强的RNAi载体转染A375细胞后,用细胞计数检测细胞增殖的变化.结果 构建的3个RNAi质粒和对照组相比,pLTE-hMIA-RNAi352质粒对MIA的表达减少量＞80%,hMIA的mRNA水平下降约83%,与对照组比较差异有显著性意义.而pLTE-hMIA-RNAi203、pLTE-hMIA-RNAi343质粒对MIA的表达及mRNA水平的影响,与对照组比较差异无显著性意义.转染pLTE-hMIA-RNAi352质粒的A375细胞增殖能力较对照组显著下降.结论 构建的针对人MIA基因352位靶序列的RNAi质粒pLTE-hMIA-RNAi352可显著抑制MIA的表达及A375细胞增殖.
