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GST-HPV 6bE7融合蛋白文献资料
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人乳头瘤病毒6b型E7基因的克隆和表达
目的克隆人乳头瘤病毒6b型E7(human papillomavirus 6b E7)基因,构建原核表达载体,并进行蛋白表达和纯化.方法将HPV 6bE7基因经PCR扩增和亚克隆,与GST原核表达载体pGEX-4T-2重组,转化E.coli P2392菌表达蛋白,经Glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化GST-HPV 6b E7融合蛋白.结果限制性酶切和DNA测序表明,HPV 6b E7 DNA正确克隆于pGEX-4T-2多克隆位点.经IPTG诱导表达的GST-HPV 6b E7融合蛋白主要存在于可溶性上清.经亲和层析,每升诱导菌回收8.4 mg融合蛋白,10%SDS-PAGE分析融合蛋白表观分子量约37 kDa.结论成功构建了HPV6bE7基因原核表达载体,并大量表达和纯化了GST-HPV 6bE7融合蛋白.
