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重组酶Cre在体外对LoxP标记的基因组进行重组的初步研究
目的:研究逆转录病毒体系转导的重组酶Cre在体外对LoxP标记的基因组进行重组的能力.方法:用逆转录病毒表达Cre,体外感染条件性基因剔除(即LoxP标记的基因)小鼠来源的原代培养的牙乳头间充质细胞.从被感染的牙乳头间充质细胞中提取基因组DNA,用PCR的方法显示LoxP标记的基因组长度的变化,从而反映Cre在体外的重组能力.结果:被表达Cre的逆转录病毒感染的牙乳头间充质细胞,其标记的基因组长度发生了预期的变化,被标记的部分发生缺失.结论:用逆转录病毒体系转导重组酶Cre能够有效地对LoxP标记的基因组进行重组.为用这一方法在体外研究特异基因对细胞生物学行为的影响奠定基础.
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逆转录病毒转导的重组酶Cre在体外对LoxP标记的小鼠骨髓细胞DNA重组
目的: 研究逆转录病毒体系转导的重组酶Cre在体外对LoxP标记的基因组进行重组的能力. 方法: 用逆转录病毒表达Cre,体外感染条件性基因剔除(即LoxP标记的基因)小鼠来源的原代培养的骨髓细胞. 从被感染的骨髓细胞中提取基因组DNA,利用PCR的方法显示LoxP标记的基因组长度的剪切前后改变,从而反映Cre在体外对LoxP标记的基因组的重组力. 结果: 被表达有Cre的逆转录病毒感染后的骨髓细胞,其特定的基因组长度发生了预期的变化,被标记的片段部分发生缺失. 结论: 在体外,用逆转录病毒体系转导重组酶Cre能够有效地对LoxP标记的基因组进行重组. 为用这一方法在体外研究特异基因对细胞生物学行为的影响奠定基础.