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PCR-SR分析文献资料
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基因测序技术在中药质量研究中的应用(Ⅰ)——山东郓城猴头半夏基原的DNA测序鉴别
目的:分析半夏Pinellia ternata(Thunb.)Breit.及其伪品虎掌南星Pinellia pedatisecta Schott的核基因组序列,为半夏正品基原鉴别提供分子依据.方法:采用PCR直接测序技术测定半夏及其伪品的18S rRNA基因核苷酸序列并作序列变异和选择性内切酶谱(PCR-SR)分析.结果:半夏和伪品的18S rRNA序列长度均为1805 bp,根据排序比较,半夏原植物与商品药材间的序列完全相同,虎掌南星亦如此.而半夏与其伪品虎掌南星间则存在序列差异(有 4个变异位点).在半夏18S rRNA序列中有一个限制性内切酶Ase Ⅰ识别位点,通过PCR-SR图谱显示800 bp和900 bp 2个酶切片断,而虎掌南星则无此位点,PCR-SR图谱显示1个未消化的1800 bp片断.结论:通过核基因组序列和PCR-SR图谱差异, DNA测序技术可成为半夏正品基原鉴别准确而有效的分子方法.
