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酶学动力学文献资料
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人红细胞内核苷二磷酸激酶的酶学特性及动力学研究
目的:探讨人红细胞(RBC)内核苷二磷酸激酶(NDPK)的酶学动力学特性.方法:利用NDPK催化反应底物二磷酸脱氧腺苷、三磷酸脱氧鸟苷生成三磷酸脱氧腺苷及二磷酸脱氧鸟苷(dADP+dGTP(←)dATP+dGDP)的酶促反应,通过改变反应温度、热处理温度、pH条件、底物浓度及抑制剂浓度进行NDPK酶学动力学研究.结果:底物动力学研究中,Linewever-Burk双倒数图为两组平行直线.产物抑制动力学研究中,固定反应底物dGTP浓度并改变dADP浓度时,dATP表现为非竞争性抑制作用,固定反应底物dADP浓度并改变dGTP浓度时,dATP表现为竞争性抑制作用.反应遵循乒乓机制.文中实验条件下,NDPK酶促反应大速度Vmax约为110 μmol·min-1· g-1,KmdADP=1.26 mmol·L-1,KmdGTP=l.94 mmol· L-1.dATP抑制常数Ki约为0.34～0.67 mmol·L-1.结论:NDPK为酶促反应dADP+dGT dAPT+dGDP的一种高亲和性催化酶.
