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免疫原性研究文献资料
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重组人肠道病毒71型疫苗效价测定方法建立及免疫原性研究
目的:建立重组人肠道病毒71型(EV71)疫苗效价测定方法以及免疫原性研究.方法:将BALB/c小鼠按不同周龄、免疫途径和免疫剂量分组,共5组,分别于d天免疫,14、21、28 d采血,采用经典微量细胞病变法进行EV71中和抗体阳转率的检测.另外将6～8周龄小鼠分成6组(10只·组-1),剂量范围(1 ～0.0312 μg),0d免疫,28 d采血进行中和抗体效价测定,同时取脾淋巴细胞采用ELISPOT法测定经体外刺激分泌IFN-γ的水平,并取细胞上清液采用ELISA法测定分泌IFN-γ,IL-2和IL-4的水平.结果:通过比较各组血清中和抗体阳转率可以得出:效价测定佳条件为:6～8周龄雌性BALB/c小鼠,免疫途径为腹腔注射,0d免疫,28 d采血,剂量范围0.5～0.0039 μg.BALB/c小鼠经1次免疫后,EV71疫苗组小鼠血清中和抗体效价呈剂量效应关系,所有EV71疫苗组小鼠脾淋巴细胞分泌的IFN-γSFC值均显著高于佐剂组(P＜0.01);EV71疫苗组分泌IFN-γ和IL-2水平显著高于佐剂组(P＜0.05),并且EV71疫苗组也能分泌一定量的IL-4.经统计分析,ELISPOT法与ELISA法检测IFN-γ水平的结果高度相关(r=0.751).结论:建立了一种重组肠道病毒71型疫苗效价测定的方法,EV71疫苗能够使BALB/c小鼠产生具有剂量效应关系的体液免疫反应,并且还能诱导BALB/c小鼠脾淋巴细胞产生特异性IFN-γ、IL-2和IL-4细胞免疫反应的应答,为后续的EV71疫苗研发及质量控制提供了一定基础.
