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高血压患者人巨细胞病毒感染率及其血浆中和抗体水平分析
目的 对高血压患者人巨细胞病毒(HCMV)感染率及其血浆中和抗体水平展开研究分析,研究高血压与人巨细胞病毒感染的相关性.方法 随机选取2011年12月-2013年12月期间接收治疗的50例高血压患者血标本作为观察组,同时选取50例健康体检人员的血标本作为对照组.对两组标本人巨细胞病毒特异性中和抗体、人巨细胞病毒特异性IgG和IgM、人巨细胞病毒特异性UL93 DNA进行检测.结果 观察组HCMV UL93 DNA的阳性率为72.0％,HCMV IgG阳性率为70.0％,HCMV IgM阳性率为4.0％;对照组HCMV UL93 DNA阳性率为54.0％,HCMV IgG阳性率为52.0％,HCMV IgM阳性率为2.0％;观察组HCMV UL93 DNA阳性率、HCMV IgG阳性率显著高于对照组,数据差异具有统计学意义(P＜0.05);两组HCMV IgM阳性率数据对比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 高血压患者人巨细胞病毒感染率显著高于健康对照组,但特异性中和抗体水平较健康对照组显著下降,即高血压患者的人巨细胞病毒感染体液免疫状态不足,高血压与人巨细胞病毒感染显著相关.
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中和试验发现西安地区为肾综合征出血热混合型疫区
目的 调查陕西西安地区汉坦病毒感染现状,分析当地肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)疫源地性质.方法 根据HFRS发病报告数据,分析西安HFRS的发病特点.通过荧光定量RT-PCR方法,检测西安HFRS疫区家鼠和野鼠携带汉坦病毒情况及病毒型别.微量中和试验确定西安本地HFRS病人、HFRS疫苗接种者和隐性感染者血清中的汉坦病毒中和抗体水平并分型,回顾性调查阳性感染者.结果 西安地区HFRS发病每年均有6-7月份的小高峰和10-12月份的大高峰;在当地642只家鼠和1 546只野鼠肺组织中检出汉滩病毒RNA136份;143份人血清中123份检测到汉坦病毒中和抗体,未检测到中和抗体的有20份.中和抗体阳性者中判定为汉滩病毒感染者92人,占74.80％;判定为汉城病毒感染者3人,占2.44％;不能区分病毒感染型别者28人,占22.76％,3例感染汉城病毒者分别为HFRS病人、疫苗接种者和隐性感染者,调查显示3例均为本地感染.结论 实验室和现场调查证实当地存在汉城型病毒本地感染,陕西西安地区是以汉滩病毒型为绝对优势的HFRS混合型疫区.
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猴/人免疫缺陷嵌合病毒(SHIV)的研究进展
SHIV是在SIV其因组框架的基础上利用基因重组技术以HIV部分基因片段来取代SIV相应基因而构建的一种重组病毒.SHIV与亲本株病毒有相似的生物学特性,能在CD4+细胞、PBMCs、巨噬细胞中复制,并能引起猴发生AIDS症状.另外SHIV能诱使机体产生中和抗体,可以作为侯选疫苗株,在AIDS预防中有广阔的前景.
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ADE与HIV感染
ADE(antibody-dependent enhancement of virus infection):抗体依赖病毒感染增强作用.机体针对病毒产生的一些抗体(可以是中和抗体也可以是非中和抗体)在某些情况下可增强病毒的感染及复制,加速病情的进展.目前认为该作用也可能增强HIV的感染,而且近年关于ADE与HIV的持续感染、母婴传播及疫苗的研究较多.本文就ADE与HIV感染的研究进展进行综述.
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陕西省铜川市健康人群流行性乙型脑炎中和抗体水平监测结果分析
目的 了解陕丙省铜川市健康人群流行性乙型脑炎(乙脑)抗体水平,为有效防控乙脑提供参考依据.方法 采用整群随机抽样的方法,选择铜川市宜君县≤2岁、3～5岁、6～10岁、11～15岁、16～45岁、46～60岁和>60岁组共216人,用微量中和试验检测乙脑病毒中和抗体.结果 铜川市健康人群乙脑中和抗体阳性率为24.07%,抗体几何平均滴度(GMT)为1:3.04;≤2岁组人群抗体阳性率及GMT均高,为63.33%和1:11.06,其他年龄组的抗体阳性率为6.45%～31.03%,抗体GMT为1:1.78～1:3.95.各年龄组抗体阳性率及GMT差异有统计学意义.结论 铜川市健康人群乙脑抗体阳性率及GMT均较低,具有引发乙脑流行的风险,应加强乙脑疫苗免疫接种工作,提高人群免疫覆盖率.
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山西和河南省部分地区人群流行性乙型脑炎病毒中和抗体水平调查
目的 调查山西和河南省部分地区健康人群血清中流行性乙型脑炎(乙脑)病毒中和抗体水平.方法 对采集的血清标本按1:10,1:20,1:40,1:80四个稀释度稀释后进行乙脑病毒中和试验,结果判定采用细胞病变观察方法并结合EHSA测定结果进行综合判定.结果 调查结果显示,所测标本中乙脑病毒中和抗体保护率以临猗县高(87.6%),其次是栾川县(58.2%)和万荣县(51.4%).经χ2检验,临猗县与万荣县中和抗体保护率差异有统计学意义(χ2=42.812,P=0.000),临猗县的中和抗体保护率高于万荣县,栾川县与万荣县的中和抗体保护率差异无统计学意义(χ2=1.466,P=0.226).两个年龄组(≤40岁和>40岁)中和抗体保护率比较显示,临猗县差异无统计学意义(χ2=0.057,P=0.811),万荣县差异有统计学意义(χ2=5.505,P=0.019),栾川县差异无统计学意义(χ2=2.129,P=0.145).结论 三个县健康人群乙脑病毒中和抗体保护率不同,这可能与当地乙脑的流行状况以及疫苗的接种情况有关.
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建立微量空斑减少方法测定人血清H7N9禽流感病毒中和抗体水平
目的 建立微量空斑减少的方法测定人血清中H7N9禽流感病毒中和抗体水平.方法 确定H7N9禽流感病毒感染MDCK细胞后形成空斑数目,进行病毒定量,系列稀释待测抗体,加入已定量病毒,计算病毒被抗体中和后空斑减少数目,确定中和抗体的滴度.实验中以H7N9病例血清测定该方法的灵敏度,以其他亚型流感病毒抗体阳性人群血清评估微量空斑减少方法的特异性,同时将该方法与微量中和实验进行比较分析.结果 微量空斑减少方法不仅能够检测H7 N9禽流感病例中和抗体水平,而且该方法检测季节性流感病毒抗体、H5N1和H9N2禽流感病毒抗体与H7N9禽流感病毒抗体之间均无交叉反应,与微量中和实验检测结果相一致.结论 建立的微量空斑减少方法具有较好的灵敏度和特异性,能够用于人血清H7N9禽流感病毒中和抗体的检测.
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2012年北京市密云县健康人群脊髓灰质炎抗体水平监测
目的 了解2012年北京市密云县健康人群脊髓灰质炎中和抗体水平.方法 按照地理位置、人口构成随机抽取密云县9个接种单位的10个行政村(居委会)为监测点.在10个行政村中随机每个年龄组抽取至少22人,共268人;且男、女性别比例在0.8 ～1.2之间.结果 此次脊灰3个型别的阳性率分别为98.51％、99.63％和99.25％;几何平均滴度(GMT)分别为1∶356.91、1∶312.04和1:233.00.不同年龄组对3个型别的脊灰抗体阳性率没有影响,但是对3个型别的脊灰抗体几何平均滴度(GMT)有影响.结论 该县健康人群脊灰中和抗体阳性率、GMT总体保持在较高水平.
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丙型肝炎病毒E2蛋白DNA疫苗诱导小鼠产生中和抗体的研究
目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)包膜E2蛋白DNA疫苗诱导小鼠产生中和抗体的可行性.方法 构建截除疏水性羧基末端的HCV包膜蛋白表达质粒pCI-1b661以及同时截除疏水性羧基末端和高变区1(HVR1)的表达质粒pCI-1b661△,转染293T细胞,以Western blot和ELISA检测细胞内和培养上清中的HCVE2蛋白,将两种表达质粒及空载体分别肌注免疫BALB/c小鼠,以ELISA检测小鼠血清中的HVR1抗体,以HCV假病毒颗粒(HCVpp)分析小鼠血清的中和活性.结果 2种表达质粒均能表达分泌性截短型E2蛋白.pCI-1b661免疫的8只小鼠血清中均可检测到HVR1抗体,而pCI-1b661△免疫血清中未检测到HVR1抗体.pCI-1b661和pCI-1b661△免疫血清对HCVpp的中和率分别为(78.5±13.8)%和(38.7±6.5)%,差异有显著性(P<0.01).pCI-1b661免疫组小鼠血清的中和率与HVR1抗体水平呈正相关(r=0.967,P<0.01).结论 表达截短型E2蛋白的DNA疫苗能诱导产生HCV中和抗体,其主要成员为HVR1抗体.
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人免疫球蛋白中肠道病毒71型中和抗体效价的测定
目的:测定人免疫球蛋白中肠道病毒71型中和抗体效价.方法:分离3株肠道病毒71型病毒株,对30批人免疫球蛋白制品进行抗-EV71中和效价检测.结果:30批人免疫球蛋白的抗-EV71型均为阳性.肌内注射用免疫球蛋白的抗-EV71型GMTs值525.5,明显高于静脉注射用免疫球蛋白(P<0.05).25批静脉注射用免疫球蛋白的抗-EV71中和效价分布为128.0~384.0.结论:为预防和治疗手足口病,筛选原料血浆中抗-EV71中和效价,研制高效价的EV71特异性免疫球蛋白制品.
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微量细胞病变法检测健康人群EV71和CVA16中和抗体水平
目的 了解深圳市福田区健康人群中肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇A16型(CVA16)隐性感染情况.方法 应用微量细胞病变法,对2011年和2012年一般人群流感抗体水平调查采集的471份血清标本进行EV71和CVA16中和抗体检测,并对检测结果进行统计学分析.结果 471份健康人群血清中EV71和CVA16中和抗体阳性率分别为25.50％和33.10％; EV71抗体由0～岁组的7.14％上升至15～岁组的42.65％(x2=42.12,P＜0.01),上升5.97倍,抗体几何平均滴度(GMT)呈缓慢上升趋势；CVA16抗体由0～岁组的9.18％上升至5～岁组的58.73％(x2=61.87,P＜0.01),上升6.39倍,抗体GMT呈波峰状；各年龄组两种抗体混合感染阳性率为11.25％(x2=64.95,P＜0.01).结论 本地区健康人群中存在肠道病毒隐性感染,各年龄组CVA16抗体阳性率均高于EV71；5～25年龄人群EV71和CVA16中和抗体阳性率、GMT和混合感染情况均高于其他年龄组,应加强5～25年龄人群的流行病学监测.
关键词： 手足口病 肠道病毒71型 柯萨奇病毒A组16型 中和抗体 -
乙型肝炎病毒表面抗原基因变异研究现状
乙型肝炎(乙肝)是全球性重大公共卫生问题之一.据估计,全世界现有乙肝病毒(HBV)携带者3.5亿,其中我国约占1.2亿.乙肝血源疫苗和基因工程疫苗阻断HBV感染的效果已得到广泛认同,但随着乙肝疫苗的普遍推广,对可逃逸HBV中和抗体的表面抗原基因(S基因)变异株感染逐步有所认识.美国、新加坡、日本、英国及世界其他地区大量研究报告显示:联合应用乙肝高效免疫球蛋白和乙肝疫苗母要阻断失败者,DNA直接测序法检测,表面抗原氨基酸置换率约为10%～40%[1～3].据调查,我国单纯乙肝疫苗免疫后携带者表面抗原氨基酸置换率为31%,比未免疫携带者高6倍[4].大量实验研究结果均显示:HBV表面抗原基因变异株同野毒株一样,有致病力和传播能力,虽现有乙肝疫苗对变异株感染的预防效果有待进一步观察,但现有免疫诊断试剂对变异株常出现漏检.乙肝疫苗明显具有免疫选择基因变异株的作用,长期推广乙肝疫苗后,HBV基因变异株有可能在免疫后人群中流行而成为新的公共卫生问题.
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天津市2009——2010年健康人群肠道病毒71型中和抗体血清流行病学调查
目的 调查天津市健康人群肠道病毒71型(EV71)隐性感染状况.方法 采集1611名天津市健康人静脉血标本进行EV71中和抗体测定,对检测结果进行分析.结果 以抗体滴度1:4作为临界值,调查对象EV71中和抗体阳性率为66 79%(1076/1611),0～5岁年龄组的抗体阳性率低为32 71%,16～25岁年龄组的抗体阳性率高为76.67%,不同年龄组的抗体阳性率差异有统计学意义.市内六区EV71的抗体阳性率低为59.05%,远郊五县的抗体阳性率高为72 35%;不同区域间的抗体阳性率差异有统计学意义.EV71抗体滴度≥1:256的人数占5.71%.经logistic回归分析,年龄、流动人口数量和区域都是影响EV71抗体阳性率的因素.结论 年龄的增长增加了EV71隐性感染的机会,但抗体水平不可能持久保持;流动人口较多、卫生条件差的地区应作为手足口病防控的重点.
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不同人群血清对麻疹疫苗株与流行株的中和能力比较
目的 探讨不同人群血清对麻疹流行株与疫苗株中和能力的差异.方法 采集麻疹患者急性期与恢复期血清、麻疹疫苗免疫前后儿童血清以及流动人口血清,分别对疫苗株沪191与2005年麻疹流行株进行中和抗体(NT)滴度测定.同时,利用疫苗株、浙江省当地流行株制备动物免疫血清,与相应毒株进行交叉中和试验,测定各毒株之间抗原比.结果 疫苗免疫后儿童血清对疫苗株的中和抗体几何平均滴度(GMT)为50.82,高于流行株Mvi/ZJ/05/7(GMT值为27.35)1.86倍;患者恢复期血清对流行株的中和能力(GMT值为386.95)显著高于疫苗株(GMT值为151.83);流动人口血清对流行株中和抗体GMT值均小于疫苗株,差异为2.22～4.17倍;Mvi/ZJ/99/1、Mvi/ZJ/04/1和Mvi/ZJ/05/7与疫苗株间抗原比分别为4.28、5.24和5.66.此外,部分患者急性期血清对疫苗株存在低滴度的中和抗体,GMT值1∶4左右.结论 不同人群血清对麻疹疫苗株与流行株的中和能力的差异有统计学意义,低滴度的疫苗抗体不能有效保护个体免受麻疹流行毒株的侵袭,应加强麻疹病毒变异与疫苗效果的相关研究.
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狂犬病毒中和抗体检测快速荧光灶抑制试验的建立
目的 建立检测狂犬病毒中和抗体的快速荧光灶抑制试验(RFFIT),检测狂犬病毒中和抗体滴度.方法 以狂犬病标准毒株CVS-11为标准攻击毒,制备三代病毒,建立CVS-11病毒库;以国际标准抗狂犬病毒血清为对照血清,参考法国巴斯德研究所的RFFIT操作标准,建立适应于中国狂犬病毒中和抗体检测的RFFIT方法 ,并验证该方法 的特异性、稳定性和重复性.结果 成功建立了检测狂犬病毒中和抗体的RFFIT试验,验证该试验方法 的特异性为100%;重复性试验表明,在本实验室和不同实验室的检测结果 P值均＞0.5,具有很好的重复性.结论 RFFIT方法 的建立进一步完善了中国狂犬病的实验室检测技术,也将提升中国狂犬病的整体监测能力.
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江苏省阜宁地区自然人群中18～45岁女性人乳头瘤病毒16、18型中和抗体及DNA的流行率
目的 研究江苏省阜宁地区自然人群中18～45岁女性人乳头瘤病毒(HPV) 16、18型中和抗体及DNA的分布.方法 2012年12月至2013年1月,采用多阶段随机抽样的方法,在江苏省阜宁地区共招募1 494名18～45岁女性,采集宫颈脱落细胞进行HPV DNA检测,采集血清并通过假病毒中和试验检测抗HPV16、18型中和抗体,采用SPSS 21.0软件分析不同年龄段HPV DNA阳性率及HPV中和抗体阳性率的差异.结果 1494名女性中HPV16型DNA阳性28例(1.9％)、中和抗体阳性188例(12.6％);HPV18型DNA阳性15例(1.0％)、中和抗体阳性60例(4.0％).HPV16、18型DNA和中和抗体阳性率在各年龄段的分布差异均无统计学意义(P＞0.0s).16.7％的研究对象已感染过HPV16和/或18型.结论 江苏省阜宁地区自然人群中18～45岁女性大多数未感染过HPV16、18型,是HPV16、18型疫苗应用的目标人群.
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浙江省仙居县2012-2013年流行性乙型脑炎病毒基因特征和人群血清学研究
目的：分析浙江省仙居县媒介蚊虫中流行性乙型脑炎（乙脑）病毒（JEV）基因型别和健康人群乙脑抗体水平。方法2012-2013年在浙江省仙居乙脑监测点采集蚊虫，分离JEV，测定其E基因核苷酸序列，并进行同源性与进化分析；对监测点的642名健康人群，在乙脑流行季节前后，分别采集双份血清，共计样本1263份，检测JEV中和抗体。结果采集11650只蚊虫标本，分离25株JEV，同源性分析显示，2012-2013年分离到的JEV与浙江省1982-2010年JEV之间E基因核苷酸同源性为87.8%～99.7%，与乙脑疫苗株SA14-14-2之间核苷酸同源性为87.7%～88.0%。E基因进化分析显示，2012-2013年JEV属于基因Ⅰ型，E基因编码病毒毒力和抗原表位的位点未发生改变。健康人群JEV中和抗体阳性率为31.5%～42.0%，抗体几何平均滴度（GMT）为1∶2.56～1∶3.53，流行前后人群抗体阳性率（χ2≤1.76，P＞0.05）和GMT（u≤0.64，P＞0.5）差异均无统计学意义。结论2012-2013年浙江省仙居县蚊媒中携带基因Ⅰ型JEV，健康人群JEV中和抗体阳性率≤42.0%，流行前后抗体阳性率和中和GMT均无明显变化。
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流行性出血热双价灭活疫苗的安全性和免疫原性观察
目的 观察流行性出血热(EHF)沙鼠肾细胞双价灭活疫苗的安全性和免疫原性.方法 以高发疫区现场青壮年为对象,基础免疫3针,一年后加强1针.采用间接免疫荧光试验、微量细胞病变中和试验检测接种后荧光抗体和中和抗体,重点观察部分接种者免疫后72 h内的全身体温反应和局部副反应.结果 基础免疫后2周,荧光抗体阳转率及几何平均滴度(GMT)分别为99.04%、24.51±2.06;中和抗体阳转率及平均滴度对76-118(Ⅰ型)为91.30%、18.27±2.21,对UR(Ⅱ型)为88.41%、12.47±2.16.基础免疫后1年,荧光抗体阳转率下降为37.34%,中和抗体总阳转率近80%.加强后2周,荧光抗体和中和抗体阳转率均为100%,中和抗体滴度对Ⅰ型为37.09±2.24,对Ⅱ型为32.61±2.05.接种后全身体温反应发生率为0.46%,局部反应发生率为1.98%,未见严重副反应发生.结论 流行性出血热双价灭活疫苗近期免疫效果良好,接种副反应率低.
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陕西省麻疹高接种率和高发病率的原因分析
目的 探讨陕西省麻疹高接种率下高发病率的病原学和疫苗免疫相关因素.方法 分析麻疹病例年龄及免疫史.从咽拭子中分离病毒,用酚-氯仿抽提法提取病毒RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增N基因-COOH端的450个核苷酸(bp)片段,进行序列测定和基因分型.用微量中和试验测定疫苗免疫血清及麻疹病例急性期血清中和疫苗株和野毒株的抗体水平.结果 麻疹病例中有麻疹疫苗免疫史的平均占38.97%;麻疹病例急性期血清:有免疫史的中和S191株GMT(56.18)明显高于H1野毒株GMT(26.90);无免疫史的S191株GMT(25.40)与H1野毒株(27.86)相近.疫苗免疫血清:S191株抗体效价≤16血清中有19.15%为H1野毒株抗体阴性.结论 陕西省近年出现的麻疹高接种率水平下的高发病率现象不排除麻疹流行株变异和疫苗对流行株H1基因组野毒株保护性不足两方面因素.
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流行性出血热疫苗免疫不同敏感动物中和抗体比较
中和抗体是反映疫苗效果的有效重要指标之一。因此，选择合适的敏感动物作为实验动物成为疫苗免疫效果检定方法中很重要的内容。目前各个国家用于出血热试验选用动物比较混乱，世界卫生组织也没有统一规定，即没有建立动物模型［1］。研究出血热早是韩国，目前采用豚鼠作为检测中和抗体的实验动物［2］。中国药品生物制品检定所(检定所)暂规定用白色家兔作为实验动物。本实验的目的是在现有实验动物中筛选出一个对出血热敏感，个体差异小，能产生高滴度抗体的标准动物，为以后建立出血热动物模型作些先期工作。 一、材料与方法 1.疫苗：选用3批合格疫苗(批号94-6-3、94-5-1、94-7-3)。 2.动物：金黄地鼠60只，5～6周龄；小白鼠60只，15～20 g；白色家兔12只，2～3 kg；豚鼠12只，250 g。实验动物均由卫生部长春生物制品研究所动物室提供。
