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抗多药耐药基因肽核酸与反义寡脱氧核苷酸增强K562/ADM细胞的敏感性和促进凋亡
目的:研究多药耐药基因mdr1特异性肽核酸(MDR1-PNA)和反义寡脱氧核苷酸(MDR1-ASODN)对耐药白血病K562/ADM细胞耐药性和凋亡抑制的逆转效应.方法:合成互补于mdr1基因mRNA的PNA和硫代ASODN,直接转染细胞,MTT比色法检测细胞增殖活性;流式细胞仪检测细胞周期和P-糖蛋白(P-gp)表达;激光共聚焦显微镜观察细胞内多柔比星(ADM)含量和分布.结果:MDR1-PNA 1-10 μmol/L和MDR1-ASODN 2-20 μmol/L不抑制K562/ADM细胞的增殖,但下调K562/ADM细胞P-gp的表达,增加细胞内ADM的含量,提高K562/ADM细胞对ADM诱导凋亡的敏感性而逆转其耐药性.PNA的作用较ASODN高3.1倍,无论是PNA还是ASODN均不能完全阻断P-gp的合成.结论:mdr1基因特异性PNA和反义ODN抑制耐药白血病细胞P-gp的表达而逆转其耐药性和凋亡抑制,PNA的活性高于相同序列的ASODN.
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端粒酶RNA组分反义寡脱氧核糖核苷酸类对人肝癌细胞端粒酶活性的抑制和细胞周期的调节
目的:研究端粒酶RNA组分反义寡脱氧核糖核苷酸类对人肝癌细胞端粒酶活性及其细胞周期的影响.方法:用改良的端粒重复扩增法检测端粒酶活性.用流式细胞仪检测细胞周期.结果:端粒酶在四种人肝癌细胞株中都有表达,而在正常人肝细胞中却不表达.端粒酶RNA组分的反义寡脱氧核糖核苷酸类在体外明显抑制BEL-7404人肝癌细胞的端粒酶活性并使细胞周期阻滞在G2/M期.结论:端粒酶RNA组分的反义寡脱氧核糖核苷酸类在体外可抑制人肝癌细胞的端粒酶活性并使细胞周期阻滞在G2/M期.
关键词: 端粒酶 RNA 肝细胞癌 反义寡脱氧核糖核苷酸类 细胞周期