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扇贝多肽对H2O2诱导HaCaT细胞氧化损伤的作用
目的 了解扇贝多肽对H2O2诱导的HaCaT细胞氧化损伤的保护作用及其机制.方法 取对数生长期HaCaT细胞,随机分为正常对照组(细胞正常培养)、模型组(200 μmol/L的H2O2作用12 h)、扇贝多肽不同浓度组(低、中、高浓度,分别用1.42、2.84、5.68 mmol/L的扇贝多肽预处理2h后,再给予200 μmol/L的H2O2作用12 h),应用Hochest33258染色方法检测各组细胞凋亡率,CCK8检测细胞存活率,以二氢荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)为荧光探针、流式细胞术检测细胞内的活性氧(ROS)含量,蛋白印迹法检测生长阻滞和DNA损伤诱导修复基因45a(Gadd45a蛋白)的表达.结果 与正常对照组比较,模型组的细胞凋亡率明显升高(F＝439.80,q=38.24,P＜0.01),细胞存活率下降(F＝191.40,q=214.10,P＜0.01),细胞内ROS含量增加(F＝121.10,q＝31.02,P＜0.01),Gadd45a蛋白表达升高(F=66.59,q＝14.57,P＜0.01);与模型组比较,扇贝多肽各浓度组细胞凋亡率明显降低(q=9.60～25.82,P＜0.01),细胞存活率升高(q＝13.47～54.86,P＜0.01),细胞内ROS减少(q＝4.20～12.14,P＜0.01),Gadd45a蛋白表达降低(q=4.04～15.55,P＜0.01);扇贝多肽各浓度组间比较,随扇贝多肽浓度升高,细胞凋亡率下降,细胞存活率升高,细胞内ROS含量降低,Gadd45a的表达降低,差异有显著性(q＝3.96～23.36,P＜0.05).结论 1.42～5.68 mmol/L扇贝多肽能够清除细胞内的ROS,抑制Gadd45a蛋白的表达,从而保护H2O2诱导的HaCaT细胞氧化应激损伤.
