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DNATyper Y21直扩试剂盒技术指标测试及应用价值评价
目的 测试DNATyper Y21直扩试剂盒的技术性能指标,评估其在法医学中的应用价值.方法 收集270份无关男性血液采集卡、80份常见检材和40份日常检案样本.对DNATyper Y21直扩试剂盒方法学(扩增体系、引物量、退火温度和循环次数),技术指标(灵敏度、稳定性、种属特异性,对混合样本、常见检材及建库样本的检测能力)进行测试.结果 该试剂盒分型准确、图谱清晰,各等位基因峰高均>400相对荧光单位,佳条件为10μL体系,1×引物量,59℃退火温度,28次循环.试剂盒准确性、一致性、均衡性、种属特异性均良好,小检出量为0.125ng,女性DNA存在下(300∶1)仍然具有高灵敏性,且在不同批次试剂间结果稳定,对骨骼、血痕、唾液斑等不同常见检材有较好的适应性.结论 DNATyper Y21直扩试剂盒可应用于法庭科学实际检案与建库.
关键词: 法医物证学 直接扩增试剂盒 确证实验 DNATyper Y21 Y-STR -
新鲜血痕样本直接扩增试验条件比较
目的 探讨新鲜血痕在不同直接扩增试剂盒的试验条件.方法 存放2d内的新鲜血痕FTA卡540份和存放1~3m的陈旧性血痕FTA卡270份,各分别随机均分为3组,每份血痕打3片1.0mm纸片,分别用DNATyperTM 15Plus试剂盒、GoldeyeTM20A试剂盒和华夏TM试剂盒在标准条件(说明书条件)、优化条件1(标准条件+1μL DMSO)和优化条件2(标准条件+室温浸泡1h)扩增检验,比较在3种条件下各组STR检验成功率.结果 陈旧血痕样本用3种直扩试剂盒,在3种条件下,检验成功率均> 97.00%,且均高于新鲜血痕.新鲜血痕在标准条件和优化条件1下,成功率为27.22%~31.67%,在优化条件2下,检验成功率相似(>97.00%),与标准条件和优化条件1比较,有统计学差异(P<0.01).结论 新鲜血痕在加入直接扩增试剂后于室温浸泡1h,可有效提高STR检验成功率.