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死亡人体组织中rRNA亚基的稳定性及影响因素评价
目的 探讨人尸体组织中rRNA亚基表达水平的稳定性及影响因素.方法 选取3例成人、3例婴幼儿大脑皮质和脾组织,在尸检即刻、48、72、96、120、144、168、192、216、240h,采用实时荧光定量RT-PCR法检测5s、5.8s、18s、28s rRNA的表达水平.结果 两个年龄组两种组织中4种rRNA亚基表达量相比较均显示有差异(P＜0.05).同种组织比较:脑组织中两个年龄组后一个时间点与第一时间点4种rRNA亚基的表达量均有差异(P＜0.05),其他各时间点与第一时间点无显著性差异(P＞0.05);脾组织中婴幼儿5s rRNA在后一个时间点,其余3种rRNA亚基后两个时间点与第一时间点比较有差异(P＜0.05);成人5s rRNA后一个时间点,5.8s rRNA亚基后两个时间与第一时间点比较差异(P＜0.05),其余两种亚基各时间点与第一时间点相比较均无差异(P＞0.05).结论 尸体组织中rRNA亚基表达稳定性好,适于作为晚期死亡时间推断的内参基因使用,但需注意指标、组织和年龄段差异性.
关键词： 法医病理学 rRNA亚基 实时荧光定量RT-PCR 尸体组织 -
死亡人体胸肌组织中rRNA亚基的稳定性评价
目的 观察尸体胸大肌组织中rRNA各亚基表达水平的死后稳定性,探讨其在死亡时间推断中应用的价值.方法 选取6例(3例成人、3例婴幼儿)外界温、湿度环境基本一致、死亡时间基本一致(24h以内)的个体,提取左侧胸大肌组织,在PBS缓冲液中低温冻存,分别在尸检即刻、2、3、4、5、6、7、8、9、10d提取微量组织保存于RNA固定液中,通过实时荧光定量RT-PCR技术检测rRNA 5srRNA、5.8srRNA、18srRNA、28srRNA亚基的表达水平.并分析年龄、死因对rRNA亚基表达水平的影响.结果 死后各时间点rRNA各亚基的表达随死后经过时间延长无显著性降解,Ct值变化与死后经过时间无相关性(P值均大于0.05),其中5s rRNA在18.503 ±2.655 ～20.937±2.340之间,5.8s rRNA在17.687±3.011～20.617±2.204之间,18s rRNA在16.457±3.920～22.330±2.571之间,28s rRNA在15.077±6.051 ～22.207±2.685之间.结论 人体胸肌组织中rRNA各亚基稳定性好,其各亚基的表达量与死因、年龄无关,适于作为晚期死亡的推断的内参基因.
关键词： 法医病理学 rRNA亚基 实时荧光定量RT-PCR 胸大肌 晚期死亡时间
