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国产磁珠结合自动化工作站批量提取生物检材DNA的应用
目的 建立国产磁珠结合自动化工作站批量提取案件中牛物检材DNA的方法.方法 采用国产磁珠结合Bio-Robert Universal System自动化工作站对案件中常见的生物样本进行DNA提取,检测Identifiler系统16个STR基因座,在ABI3130XL遗传分析仪上进行STR分型.其中210份样品同时在ABI7500型荧光定量PCR仪上进行定量.结果 9 100份10类生物检材应用国产磁珠结合自动化工作站,大部分可提取到足够的DNA进行STR检验.STR检验成功率高的为口腔拭子、肌肉,达100%,接触细胞检材的成功率较低,为50.0%.结论 国产磁珠结合自动化工作站可用于案件中常见的大部分生物样本的DNA提取.
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两种国产磁珠试剂盒对常见PCR抑制物去除效果比较
目的 比较国产博坤磁珠试剂盒和Wawasye磁珠试剂盒对法医学常见PCR抑制物的去除效果.方法 选择6种常见PCR抑制物,胆汁酸盐、胶原质、腐殖酸、血红素、黑色素和尿素,分别将其与K562 DNA混合后,采用Identifiler试剂盒进行分型,以恰好抑制K562 DNA所有26个不同等位基因的抑制物浓度为标准添加浓度,在此基础上提高每种PCR抑制物的浓度,分别采用两种磁珠试剂盒对混有抑制物的标准品DNA进行纯化处理后,再进行PCR扩增和STR分型检测,统计STR基因座等位基因检出个数.结果 分别混有1×、2×和4×标准添加浓度各种抑制物的K562 DNA经博坤磁珠试剂盒纯化后,均可检出所有STR基因座的全部等位基因;经Wawasye磁珠试剂盒纯化后,混有胆汁酸盐、胶原质、血红素和尿素的DNA均可检出所有STR基因座的全部等位基因,而混有腐殖酸和黑色素的DNA未检出任何等位基因.结论 除Wawasye磁珠试剂盒无法有效去除腐殖酸和黑色素外,两种国产磁珠试剂盒对大多数PCR抑制物均具有良好去除效果.