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基于八腔室玻片的染色体畸变初筛方法的建立与验证
目的:为简化传统体外染色体畸变试验工序并减少受试物用量,建立基于八腔室玻片的染色体畸变初筛方法.方法:首先利用环磷酰胺(CP)和丝裂霉素C(MMC)作为阳性模式药物,分别建立CP作用6 h(+S9)和MMC作用24h(-S9)的八腔室玻片的染色体畸变试验方法.再用于检测5个已知遗传毒性物质苯并芘[B(a)P]、2-氨基蒽(2-AA)、甲基磺酸甲酯(MMS)、乙基磺酸甲酯(EMS)、依托泊苷(Eto)和2个非遗传毒性药物氨苄青霉素钠(AS)和氯化钠(SC)在±S9两个条件下的染色体畸变效应,验证该法的灵敏度和特异性.结果:CP和MMC分别在±S9活化系统中染色体结构畸变率呈浓度依赖性增加,与溶剂对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01).在验证试验中,B(a)P和2-AA在+S9系统中呈染色体畸变阳性,与溶剂对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);MMS、EMS和Eto的染色体畸变率呈浓度依赖性增加(±S9结果均为阳性),与溶剂对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);而2个已知非遗传毒性药物(AS和SC)在±S9系统中均呈阴性结果.结论:通过上述物质的验证表明,八腔室玻片染色体畸变试验是一种简单、快速、有效的遗传毒性初筛方法.