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反向mRNA斑点印迹文献资料
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利用反向mRNA斑点印迹从抑制消减杂交阳性克隆中筛选差异表达基因
目的:建立一种从抑制消减杂交阳性克隆中筛选差异表达基因的方法.方法:以阵列方式将抑制消减杂交阳性克隆的PCR产物点加于尼龙膜上,以标记polyA+RNA为探针进行反向杂交,化学发光法检测,在图象分析仪上进行光密度扫描,计量平均单位面积光密度,扣除背景,计算两个阵列各对应点之间光密度值的比值R(ratio).差异表达基因的阳性判定标准为R值大于或等于2.00.结果:通过反向mRNA斑点印迹技术可以从抑制消减杂交阳性克隆中把差异表达基因有效地筛选出来.结论:反向mRNA斑点印迹技术是一种筛选抑制消减杂交差异表达基因的有效方法.
关键词： 抑制消减杂交 基因克隆 差异表达基因 反向mRNA斑点印迹 筛选
