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Taq-Man文献资料
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Taq-Man实时荧光定量RT-PCR
[目的]建立BcL-2 Taq-Man实时荧光定量RT-PCR的方法.[方法]老年肾虚患者与年轻对照组各10例为检测对象,外周血单个核细胞中提取RNA,每份RNA标本分为Bcl-2测定管与β-actin校正管.Roche公司Lightcycle分析软件自动监测PCR每-扩增过程中的荧光强度,并根据不同浓度梯度(103～107)守家基因β-actin的外参照标准曲线自动求出每份标本中Bcl-2与β-actin的浓度值,将每份标本的Bcl-2测定值以β-actin测定值加以校正即可得出Bcl-2的相对含量.[结果]Bcl-2的所测范围为102至106,标准品β-actin实测值与理论值非常接近,所以标准曲线呈良好的线性关系(r=1.00).年轻对照组Bcl-2的相对含量为老年肾虚患者的10倍(P＜0.01).[结论]Bcl-2 Taq-Man实时荧光定量RT-PCR检测方法敏感,准确,简便易行.
关键词： Taq-Man lightcycle RT-PCR Bcl-2
