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PCNA和CyclinD1在腮腺恶性多形性腺瘤组织中的表达和临床意义
目的 研究增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen,PCNA)以及细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)在腮腺恶性多形性腺瘤组织中的阳性表达情况以及临床意义.方法 使用免疫组织化学染色方法分别观察从2016年1月-2017年12月在盐城市第一人民医院病理科37例正常腮腺组织、37例多形性腺瘤组织和59例恶性多形性腺瘤组织中的PCNA和CyclinD1阳性表达情况.结果 PCNA和Cyclin D1在正常腮腺组中的阳性表达率分别为10.81％和2.77％,在多形性腺瘤组阳性表达率为45.95％和43.24％,在恶性多形性腺瘤组的阳性表达率为83.05％和86.44％,PCNA和Cyclin D1在正常腮腺组中的阳性表达率低于多形性腺瘤组阳性和恶性多形性腺瘤组在多形性腺瘤组中的阳性表达率,差异有统计学意义(P<0.05).PCNA与Cyclin D1在肿瘤直径>4 cm、TNM分期为III,IV期、有淋巴结转移的恶性多形性腺瘤组织中的阳性表达率高于肿瘤直径≤4 cm、TNM分期为I,II期、无淋巴结转移的恶性多形性腺瘤组织中的阳性表达率,差异有统计学意义(P<0.05).Cyclin D1与PCNA在恶性多形性腺瘤的表达成正相关(r=0.821,P<0.05).结论 CyclinD1、PCNA蛋白在恶性腮腺混合瘤中的阳性表达明显增加,表明其异常表达与恶性腮腺混合瘤发生可能密切相关,并可能对预测恶性腮腺混合瘤预后有重要意义.
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Ku80在石英诱导细胞周期改变中作用
目的 探讨Ku80蛋白在石英诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)细胞周期改变中的作用及机制.方法 200 μg/mL石英按0、3、6、12、24 h处理各组细胞,采用RNAi技术抑制Ku80蛋白表达(H-Ku80),采用流式细胞术检测石英刺激24 h不同细胞系的细胞周期变化情况,免疫印迹技术检测不同细胞系各时间点细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)、E2增强子连接因子1(E2F1)蛋白表达和视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)表达及Rb-ser780磷酸化水平.结果 石英刺激对照细胞,G1期细胞所占比例从(89.28±2.19)％下降到(68.93±3.79)％;石英刺激H-Ku80,G1期细胞比例进一步减少,从(85.16±3.73)％下降到(59.92±3.31)％,差异均有统计学意义(P＜0.05);抑制Ku80蛋白表达后,Rb蛋白表达水平无变化,石英诱导的Cyclin D1、CDK4水平增高受抑制,而E2F1、Rb-ser780磷酸化水平进一步增高.结论 Ku80参与石英诱导的细胞周期改变,对CyclinD1、CDK4的表达呈正性调节作用;而对E2F1表达及Rb-ser780磷酸化呈负性调节作用.
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Zwint高表达对肝癌细胞增殖和肝癌肝移植预后的影响
目的 探讨Zw10结合因子(Zwint)在原发性肝癌(肝癌)中的表达情况及其对肝癌肝移植预后的影响.方法 收集50例肝癌肝移植受体的肝癌组织、癌旁组织及临床资料.采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)、蛋白免疫印迹(Western Blot)法和免疫组织化学(免疫组化)法,分别比较20例肝癌肝移植受体的20对肝癌组织及癌旁组织中Zwint信使核糖核酸(mRNA)表达情况和Zwint蛋白的表达水平;选取两个成功干扰Zwint表达的肝癌细胞系HepG-2(si-Zwint-1组和si-Zwint-2组),以空白对照作为si-NC组,采用细胞计数试剂盒(CCK)-8实验、平板克隆实验和细胞周期实验,比较各组细胞的增殖能力和细胞周期;采用Western Blot法和免疫组化法,分析肝癌组织和肝癌细胞中Zwint与细胞周期蛋白D1(cyclin D1)表达的一致性;以Zwint蛋白表达水平的中位数为分割点,将入组病例分高表达组(22例)和低表达组(28例),分析Zwint蛋白表达水平与肝癌肝移植受体临床特征、总体存活率及无复发存活率的关系.结果 实时荧光定量PCR结果提示肝癌组织中Zwint mRNA表达水平高于癌旁组织(P=0.03).Western Blot及免疫组化结果均提示肝癌组织中Zwint蛋白的表达水平高于癌旁组织(均为P<0.05).干扰肝癌细胞系HepG-2的Zwint基因后,CCK-8及平板克隆实验显示细胞增殖能力明显减弱(均为P<0.01),细胞周期阻滞于G1期(均为P<0.05).Zwint蛋白表达水平与肿瘤直径和肿瘤、淋巴、转移(TNM)分期密切相关(均为P<0.05).Zwint高表达组肝癌肝移植受体的总体存活率低于低表达组(P=0.02).结论 Zwint高表达于肝癌组织,其通过调节细胞周期促进肝癌细胞增殖,且Zwint表达水平与肝癌肝移植后预后呈负相关.
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回生口服液调控Wnt通路CyclinD1影响人肺腺癌细胞增殖的机制
目的:研究回生口服液调控Wnt信号传导通路细胞周期蛋白D1 (CyclinD1)影响人肺腺癌细胞(LAG)增殖的机制.方法:制备高、中、低剂量(11.6 g/kg,5.8 g/kg,2.9g/kg)回生口服液含药血清,与人肺腺癌细胞系共同培养,MTT法检测含药血清对肺腺癌细胞的抑制率,流式细胞仪检测肺腺癌细胞周期相对分布;建立C57BL/6人肺腺癌荷瘤小鼠模型,予回生口服液高、中、低剂量治疗,免疫组化法检测小鼠移植瘤肺腺癌细胞Cyclin-D1阳性表达水平.结果:与阴性对照组比较,回生口服液高、中剂量组及顺铂组合药血清对肺腺癌细胞的生长抑制率明显增高,且干预的肺腺癌细胞G1期细胞比例明显增高,S期、G2期细胞比例明显减少(P ＜0.01,P＜0.05);回生口服液中、高剂量及顺铂(DDP)治疗组小鼠肺腺癌细胞内CyclinD1阳性表达率明显低于模型组(P＜0.01).结论:回生口服液可明显抑制人肺腺癌细胞生长,使癌细胞停滞于细胞周期的G1期,并可明显降低肺腺癌细胞内CyclinD1的阳性表达.
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EB病毒潜伏膜蛋白LMP1、VEGF和cyclinD1在乳腺癌中的表达及其相关性
目的:探讨乳腺癌中EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)潜伏膜蛋白1(latent membrane protein 1,LMPl)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的表达及其相关性.方法:收集乳腺癌标本构建组织芯片,应用免疫组化方法检测LMP1、VEGF和cyclinD1的表达,并结合临床病理因素进行相关分析.结果:乳腺癌组织中LMP1、VEGF及cyclinD1的表达率分别为17.8％(19/107)、85.0％ (91/107)和64.5％ (69/107);LMP1和cyclinD1的表达与患者年龄、肿瘤大小、病理学类型、淋巴结转移及脉管侵犯均无明显相关性(P＞0.05),而两者的表达均与组织学分级有关(P＜0.05);VEGF的表达与患者年龄、肿瘤大小、病理学类型、组织学类型及脉管侵犯均无明显相关(P＞0.05),而与淋巴结转移存在相关性(P＜0.05);LMP1的表达与VEGF和cyclinD1均明显相关(P＜0.05),同时,VEGF与cyclinD1表达明显相关(P＜0.05).结论:乳腺癌中LMP1可能直接上调VEGF的表达,或者LMP1通过促进cyclinD1的表达来上调VEGF的表达,从而对乳腺癌的淋巴转移及发生发展起到促进作用.
