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肾母细胞瘤过度表达基因CCN3和肿瘤转化因子β1在妊娠期糖尿病胎盘上的表达
目的 探讨肾母细胞瘤过度表达蛋白(NOV,CCN3)和肿瘤转化因子β1(TGFβ1)在妊娠期糖尿病(GDM)胎盘组织中的表达变化及其意义.方法 应用免疫组织化学方法 检测GDM和正常足月妊娠分娩胎盘组织中CCN3和TGFβ1表达情况.结果 CCN3和TGF-β1表达阳性率,正常足月妊娠分娩组分别为18 %和52 %,GDM组分别为40 %和100 %,差异有统计学意义.结论 CCN3和TGFβ1可能在GDM病理过程中起重要作用.
关键词： 肾母细胞瘤过度表达蛋白 肿瘤转化因子β1 免疫组织化学 妊娠期糖尿病 胎盘 -
CCN3通过上调微小RNA-29a表达抑制肾小球系膜细胞胞外基质的合成
目的 研究肾母细胞瘤过度表达蛋白(nephroblastoma over-expressed protein,CCN3)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肾小球系膜细胞胞外基质(ECM)合成的影响及微小RNA-29(miRNA-29)在其中的作用机制.方法 体外培养人肾小球系膜细胞(HMC),观察外源给予不同浓度(5、50、500 μg/L)重组CCN3蛋白或内源转染pcDNA-3.1(+)-CCN3质粒对TGF-β1诱导的ECM和miRNA-29家族(a、b、c)表达的影响.HMC转染miRNA-29a抑制物和类似物,探讨miRNA-29a在CCN3调节TGF-β1诱导的ECM表达中的作用.实时荧光定量PCR检测各组纤连蛋白(FN)、I型胶原蛋白(COLI)的mRNA及miRNA-29家族(a、b、c)的表达,Western印迹检测各组FN、COLI的蛋白表达,细胞免疫荧光检测各组FN、COLI的表达.结果 (1)与正常对照组比较,TGF-β1干预后HMC的FN、COLI蛋白及mRNA表达均增加,miRNA-2％、b、c的表达均降低(均P＜0.05).(2)不同浓度CCN3重组蛋白干扰和转染CCN3质粒后TGF-β1诱导的FN、COLI蛋白及mRNA的表达均低于TGF-β1组(均P＜0.05);而50、500 μ,g/L CCN3重组蛋白干预组和转染CCN3质粒组miRNA-29a的表达较TGF-β1组增加(均P＜ 0.05),其余miRNA-29家族表达与TGF-β1组比较差异无统计学意义(均P＞0.05).(3)与TGF-β1+重组CCN3蛋白组比较,TGF-β1+重组CCN3蛋白+miRNA-29a类似物转染组FN及COL I的表达减少(均P＜0.05),而TGF-β1+重组CCN3蛋白+miRNA-29a抑制物转染组FN及COLI的表达均增加(均P＜0.05).结论 CCN3可通过上调miRNA-29a抑制TGF-β1诱导的HMC合成ECM.
