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Ⅱ级生物安全柜"三个保护"现场实验方法探究
为保证使用人员、实验样品及环境不被污染,在进一步验证安全柜的生物防护性能的同时,探究出更适用于现场检验的实验方法.通过微生物法和碘化钾法的对比研究,针对产品和交叉污染保护的碘化钾实验方法进行探究.
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改良碘化钾法提取基因组DNA在儿科研究中的应用
制备基因组DNA是进行分子生物学基因研究的重要步骤.在儿科实际工作中,由于标本采集困难,如何能快速、经济地从少量外周血中提取基因组DNA,成为摆在儿科医务工作者面前的课题.
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氧化吡啰红G-碘化钾法在血细胞髓过氧化物酶快速染色中的应用
Pereira于1984年提出了碘化钾髓过氧化物酶(MPO)染色法[1],由于不需要使用有潜在致癌作用的联苯胺,而深受欢迎.我们在试用多种显色剂取代Pereira原法中的Lishiman染料时,发现以吡啰红G(Pyronine G)为显色剂能很好地显示MPO,并采用人工预先氧化吡啰红G(PyG)溶液的新方法,使其一步到位达到佳氧化成熟程度,以后每次配制MPO染色工作液时不必加H2O2,从而建立了氧化吡啰红G-碘化钾MPO染色法(简称氧化PyG-KI法),此法染色时间短,灵敏度高,效果良好.
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Ⅱ级生物安全柜人员防护检测的探讨
目的:提高Ⅱ级生物安全柜人员防护检测效率.方法:随机抽取10台Ⅱ级生物安全柜,应用碘化钾法检测其人员防护性能,在相同环境条件下与微生物法检测进行比较.结果:碘化钾法不仅检测准确、安全、简便,而且用时远少于微生物法(微生物法平均用时46 h,碘化钾法平均用时40.3 min).结论:对于Ⅱ级生物安全柜人员的防护检测,碘化钾法优于微生物法,适合现场连续检测工作,具有广阔的应用前景.
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碘化钾法抽提冻存外周血DNA的方法初探
目的:探讨碘化钾法从冻存外周血中抽提基因组DNA的产量及质量.方法:对400μL冻存血标本(-20℃保存半年)及200 μL新鲜血标本(4℃保存不超过1周)分别采用KI法提取基因组DNA,比较其浓度和纯度.并进行CYP2C19相关基因的PCR扩增.结果:通过增加处理标本量,可以相应提高从冻存外周血中提取的基因组DNA产量,但获取的DNA纯度低于新鲜血标本.结论:KI法提取DNA时,需要根据实验目的和要求,选择适当的保存方法.
