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荧光定量巢式反转录酶聚合酶链反应文献资料
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博尔纳病病毒感染与病毒性脑炎发病的关系
目的 检测宁夏地区不明原因病毒性脑炎患者外周血单个核细胞(PBMCs)博尔纳病病毒(BDV)携带情况,分析BDV与标准病毒株之间的同源性.探讨BDV感染性疾病与不明原因病毒性脑炎之间的关系,同时也为部分病毒性脑炎的病因学诊断及其防治提供实验依据.方法 采用荧光定量巢式反转录酶聚合酶链反应(FQ-nRT-PCR)检测宁夏地区不明原因病毒性脑炎患者及正常人PBMCs BDV p24基因片段,并对其中阳性扩增产物进行基因序列测定,然后采用BLAST软件以及DNAsist 5.0软件对测序结果进行分析.结果 病毒性脑炎组样本BDVp24基因片段FQ-nRT-PCR阳性率(10.17%)显著高于正常对照组(0%)(P＜0.05).病毒性脑炎患者检出BDVp24基因片段的核苷酸序列与马BDV标准病毒株H3915序列同源性为97.67%,与H1766株比较在3个位点出现一致性突变(nt1659 T→C,nt1668 A→G,nt1674 T→C;突变率为3.49%);与strain V株比较在4个位点出现一致性突变(nt1648 C→T,nt1658 G→A,nt1667 A→G,nt1673 T→C;突变率为4.65%),但编码的氨基酸相同.证实扩增所得目的 基因片段确系BDV p24的相应片段.结论 宁夏地区不明原因病毒性脑炎患者中存在BDV感染,提示部分不明原因病毒性脑炎的发生可能与BDV感染有关.且该BDVp24扩增产物核苷酸序列与标准病毒株高度同源性,与马源strain H3915同源性高.
关键词： 博尔纳病病毒 病毒性脑炎 荧光定量巢式反转录酶聚合酶链反应
