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应用膜抗原荧光抗体试验检测人群水痘-带状疱疹病毒血清抗体阳性率
目的 应用膜抗原荧光抗体试验(FAMA)方法调查广州地区正常人群水痘-带状疱疹病毒(VZV)的流行现状.方法 采用以VZV感染细胞作为抗原、异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗人IgG作为二抗的FAMA试验,对随机抽取的592份正常人血清标本进行特异性VZV抗体检测.结果 FAMA试验检测VZV抗体与其他的疱疹类病毒的相应抗体不产生交叉反应.应用此法检测592份血清标本中,VZV抗体总体阳性率为76.52%;1～、4～、7～、14～、20～、30～、40～及≥50岁年龄组血清抗体阳性率分别是14.67%、51.56%、73.91%、91.26%、92.78%、95.65%、98.11%和100%.1～3岁年龄组血清抗体阳性率低,血清抗体阳性率随年龄的增大而升高;不同性别间阳性率差异无统计学意义(P0.005),不同年龄组间阳性率差异有统计学意义(P<0.001).结论 采用FAMA法检测人群中VZV抗体与其他疱疹类病毒的相应抗体不产生交叉反应,是VZV抗体检测的可靠方法 .应以1～3岁儿童为VZV疫苗免疫的首选对象.
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膜抗原荧光抗体法与ELISA法检测水痘-带状疱疹病毒血清抗体的比较
目的 比较膜免疫荧光抗体法(fluorescent antibody to membrane antigen,FAMA)与ELISA法检测水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)血清抗体的效果.方法 以FAMA法为“金标准”,同时用德国Serion定量ELISA试剂盒检测184份血清样本(水痘疫苗免前92份、免后92份)的VZV IgG抗体滴度,并对两种方法的测定结果进行比较.结果 FAMA法检测的阳性率为64.7％,抗体几何平均滴度(GMT)为1∶6.34,ELISA法检测的阳性率为47.8％,平均抗体活性值为492.33 mIU/ml.ELISA法的特异性为100％,阳性符合率(灵敏度)为69.7％,阳性符合率随着抗体滴度的增加而升高(z=-6.03,P＜0.001).Fisher精确概率法分析结果显示,抗体滴度1∶8、1∶16和1∶32组与≥1∶64组阳性符合率差异均有统计学意义(P＜0.05),其余各组间阳性符合率差异均无统计学意义(P＞0.05).ELISA抗体活性值与抗体滴度呈明显正相关,相关系数R2=0.656,P＜0.001;Kappa值为0.707,两种方法具有较高的吻合度.结论 德国Serion定量ELISA试剂盒在检测低抗体滴度VZV抗体时易出现假阴性,在检测高滴度VZV抗体时,两种方法敏感性相当;ELISA试剂盒检测的滴度临界值为1∶8～1∶32.该试剂盒可用于疫苗免疫效果评价和人群VZV抗体水平监测.
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建立膜抗原荧光抗体试验评价北京株冻干水痘疫苗免疫效果
为了建立用于水痘疫苗接种后血清中特异性抗体检测的膜抗原荧光抗体(FAMA)法,并对接种水痘疫苗后儿童血清中水痘特异性抗体进行检测,评价北京株水痘疫苗的免疫效果.以水痘-带状疱疹病毒(VZV)感染细胞作为抗原制备成固定抗原玻片,以异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗人IgG作为二抗建立FAMA法,并对该法的敏感性、特异性进行验证.运用此法对不同剂量北京株水痘疫苗接种后儿童血清中特异性抗体进行检测,分析儿童血清中水痘特异性抗体水平以及免后抗体阳转率,并与Oka株水痘疫苗进行比较.结果显示,FAMA法敏感性可达0.0196IU/ml,特异性好.应用此法检测300名观察者免前免后双份血清样本中抗VZV-IgG,易感者中北京株水痘疫苗原苗(39810PFU/0.5ml)、2000PFU/0.5ml、500PFU/0.5ml接种组儿童血清免后抗体阳转率分别为100%、98.77%、85.42%,抗体几何平均滴度(GMT)分别为36.4、34.3、18.6,原苗与2000PFU间的抗体阳转率和GMT均无显著性差异(P>0.05),但原苗与500PFU、2000PFU与500PFU间的抗体阳转率和GMT均有显著性差异(P<0.05).对照国产、进口Oka株水痘疫苗接种后抗体阳转率分别为95.35%、96.97%,抗体GMT分别为13.3、16.0,不同剂量北京株疫苗抗体阳转率与国产、进口Oka株疫苗相比,差别无显著性(P>0.05),但北京株疫苗原苗、2000PFU抗体GMT明显高于对照苗(P<0.05),500PFU与对照苗无显著性差异(P>0.05).北京株原苗、2000PFU、500PFU的非易感者血清抗体4倍增长率分别为100%、92.9%、75.0%,对照国产苗、进口苗分别为100%、83.8%.通过实验建立的FAMA试验法敏感、特异、抗体检出率高;北京株水痘疫苗免疫效果良好,可用于易感人群接种.
