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我国人群中抗b型流感嗜血杆菌多糖抗体水平的调查
目的 调查中国人群中抗流感嗜血杆菌多糖(Hib-PRP)自然抗体水平,为合理使用Hib菌苗提供资料.方法 从7个省市收集1 596份不同年龄组健康人群血清标本,用放射免疫方法检测抗Hib-PRP自然抗体水平.结果 甘肃、贵州、江西等地5岁以下婴幼儿平均抗体水平＜0.1μg/ml,上海、广西、黑龙江等地相对较高.脐带血平均抗体含量为0.36μg/ml,6月～5岁儿童平均抗体含量为＜0.15μg/ml,6岁至成人则达1～1.5μg/ml.结论 中国人群对Hib疾病的群体免疫力不高.6月～5岁儿童自然抗体水平低,为Hib疾病的高危人群.
关键词： b型流感嗜血杆菌多糖 自然抗体 放射免疫法 -
核磁共振波谱法测定b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中的核糖含量
目的 建立核磁共振波谱(nuclear magnetic resonance,NMR)法测定b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)荚膜多糖中核糖含量的方法.方法 利用NMR技术中的氢核磁共振波谱(1H-NMR)的定量功能,对不同浓度的D-核糖进行定量分析,验证该方法的精密度及准确度,并与传统化学方法进行比较.结果 NMR法定量结果相对标准偏差(RSD)均小于1.0％,相对误差除低浓度20 mmol/L为7.4％外,其余浓度均在1％～3％之间,不同浓度的样品回收率在97.2％ ～ 107％之间;化学法定量结果RSD在0.6％ ～7.9％之间,相对误差在3％～6.5％之间,不同浓度样品回收率在93.5％ ～ 105.3％之间;两种方法检测的3批Hib荚膜多糖中核糖含量无明显差别,均在《中国药典》三部(2010版)规定的320 ～ 410 mg/g之间.结论 1H-NMR定量方法取样少,可直接定量,该方法精密度高、准确度高、重现性好,且不破坏多糖结构,可应用于细菌荚膜多糖质量控制的核糖定量.
关键词： 核磁共振波谱法 b型流感嗜血杆菌多糖 含量测定 -
b型流感嗜血杆菌多糖竞争ELISA检测方法的建立
目的 建立竞争酶联免疫吸附分析法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA),测定b型流感嗜血杆菌多糖(PRP)浓度方法以b型流感嗜血杆菌多糖-酪胺(Ty)为包被抗原,待测多糖为竞争抗原,与优化的抗b型流感嗜血杆菌多糖抗体反应,建立标准曲线,并验证该方法的准确性和精密度.结果 优化后的b型流感嗜血杆菌多糖-酪胺包被浓度为1∶400倍稀释,抗多糖血清稀释度为1∶40K.检测线性范围6.25μg/ml～100μg/ml,低检测限为3.13μg/ml,回归方程为B/B0=-34.328[PRP]+105.03,线性相关系数为R2 =0.995.批内精密度为3.4％～6.5％,批间精密度为8.48％,测定培养基中b型流感嗜血杆菌多糖的回收率为95.7％.结论 本研究建立的b型流感嗜血杆菌多糖竞争ELISA方法准确性和精密性均较好,可以特异性地检测b型流感嗜血杆菌多糖浓度.
关键词： b型流感嗜血杆菌多糖 免疫学检测法 竞争ELISA -
b型流感嗜血杆菌多糖竞争ELISA检测方法的建立
目的 建立竞争酶联免疫吸附分析法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA),测定b型流感嗜血杆菌多糖(PRP)浓度.方法 以b型流感嗜血杆菌多糖-酪胺(Ty)为包被抗原,待测多糖为竞争抗原,与优化的抗b型流感嗜血杆菌多糖抗体反应,建立标准曲线,并验证该方法的准确性和精密度.结果 优化后的b型流感嗜血杆菌多糖-酪胺包被浓度为1∶400倍稀释,抗多糖血清稀释度为1∶40K.检测线性范围6.25 μg/ml～100μg/ml,低检测限为3.13 μg/ml,回归方程为B/B0=-34.328 [PRP]+105.03,线性相关系数为R2 =0.995.批内精密度为3.4％ ～6.5％,批间精密度为8.48％,测定培养基中b型流感嗜血杆菌多糖的回收率为95.7％.结论 本研究建立的b型流感嗜血杆菌多糖竞争EHSA方法准确性和精密性均较好,可以特异性地检测b型流感嗜血杆菌多糖浓度.
关键词： b型流感嗜血杆菌多糖 免疫学检测法 竞争ELISA
