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疏肝益肾方对他莫昔芬耐药人乳腺癌细胞株HER2-ERK/MAPK-ERα通路的影响
目的：研究疏肝益肾方对他莫昔芬（TAM）耐药的人乳腺癌细胞株（MCF-7）LCC9 HER2-ERK/MAPK-ERα通路的调控作用。方法采用中药血清药理学方法制备大鼠含疏肝益肾方中药血清，疏肝益肾方＋TAM联合血清、空白对照血清、TAM阳性对照血清，并体外作用于LCC9细胞。MTT法观察各组含药血清对LCC9细胞株的抑制率，RT-PCR检测各组雌激素受体1(ESR1)、人类表皮生长因子受体2(ERBB2)、重组人丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK3)mRNA的水平，蛋白印迹法检测各组雌激素受体α(ERα)、人类表皮生长因子受体2(HER2)、胞外信号调节激酶/丝裂原活化蛋白激酶(ERK/MAPK)、磷酸化胞外信号调节激酶/丝裂原活化蛋白激酶(p-ERK/MAPK)蛋白的表达。结果 MTT结果显示，TAM组、疏肝益肾方组、疏肝益肾方＋TAM联合组在48 h的抑制作用强，抑制率分别是（6.61±0.129）%、（47.43±2.243）%、（54.19±3.364）%，与空白组比较，疏肝益肾方组、疏肝益肾方＋TAM联合组抑制作用显著（P＜0.05），且疏肝益肾方＋TAM联合组作用优于疏肝益肾方组（P＜0.05）。TAM组与空白组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。RT-PCR结果显示，疏肝益肾方＋TAM联合组的ESR1 mRNA表达量在48 h为（2.282±0.185），较空白组升高（P＜0.05）；ERBB2、MAPK3 mRNA表达量在48 h分别为（0.71±0.095）、（0.336±0.058），较空白组下降（P＜0.05）。Western blot结果显示，疏肝益肾方＋TAM联合组在48 h时，HER2、p-ERK/MAPK的蛋白表达量分别为（0.708±0.072）、（0.228±0.034），较空白组明显下降（P＜0.05）；ERα的蛋白表达为（1.936±0.145），较空白组升高（P＜0.05），对ERK/MAPK无明显影响（P＞0.05）。结论疏肝益肾方与TAM联合应用对TAM耐药乳腺癌细胞株MCF-7 LCC9有抑制作用，且48 h抑制作用强。
