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RT-PCR法分析两种解表法中药对FM1感染小鼠肺中炎性细胞因子的影响
目的 动态观察益气清瘟解毒合剂所含辛温解表法和辛凉解表法中药对流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株(FM1)感染小鼠肺中炎性细胞因子表达的影响,探讨上述两种解表法抗流感免疫炎性损伤及其修复方面的作用机制.方法 建立FM1感染小鼠模型,将小鼠随机分为4组,分别为正常空白组、病毒感染模型组、辛温解表法组(炙麻黄6 g、羌活12 g、紫苏叶10 g)、辛凉解表法组(柴胡10 g、金银花10 g、薄荷6 g),各组按病毒感染后第1、3、5、7天不同时相各分为4个小组,每小组8只小鼠.采用反转录酶聚合酶链式反应(reverse transcriptase polymerase chain veaction,RT-PCR)法,在流感病毒感染后不同时相,动态观察辛温、辛凉解表法中药对小鼠肺中TNF-α、IL- 6、IL-1、IL-10、IFN-γ 5种炎性细胞因子RNA表达的影响.结果 (1)辛温解表法中药在FM1感染小鼠后1～5天显著降低肺组织中TNF-α的RNA表达,在FM1感染后3～5天显著降低肺组织中IL-1的RNA表达,在FM1感染后第1天及第7天显著降低肺组织中IL- 6的RNA表达,在FM1感染后第3天及第7天,显著增加肺组织中抗炎性细胞因子IL-10的RNA表达,在FM1感染后1～3天显著增加抗病毒因子IFN-γ的RNA表达.(2)辛凉解表法中药在FM1感染小鼠后3～5天显著降低肺组织中TNF-α的RNA表达,在FM1感染后第7天显著降低肺组织中IL-1的RNA表达,在FM1感染后1～7天显著降低肺组织中IL- 6的RNA表达,在FM1感染后第3天及第7天,显著增加肺组织中抗炎性细胞因子IL-10的RNA表达,在FM1感染后1～3天显著增加抗病毒因子IFN-γ的RNA表达.在FM1感染后第3天辛凉解表法中药可能增加肺组织中IL-1的RNA表达.结论 中药可能通过纠正炎性细胞因子的失衡抑制机体的炎性损伤,并促进损伤的修复,对靶器官具有免疫保护作用.
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弱精子症患者精子中电压依赖性钙通道基因表达的变化
目的:探讨弱精子症患者精子中电压依赖性钙通道基因的功能性亚单位α1 mRNA表达与弱精子症的关系.方法:首先根据WHO标准用计算机辅助精液分析(CASA)方法对供精者提供的精液进行筛选,然后用Percoll非连续梯度离心法对精子进行优化,后应用半定量反转录酶-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分别检测50例正常组成熟运动精子和50例弱精子症患者精子中各类型电压依赖性钙通道的α1 mRNA相对表达量.结果:与正常成熟运动精子相比,弱精子症患者精子中电压依赖性钙通道的α1B(39.40±9.47)、α1C(48.30±11.60)、α1E(3.20±0.78)、α1G(8.40±2.03)、α1H(5.70±1.47)mRNA表达的差异具有极显著意义(P＜0.01).结论:L型和/或非L型电压依赖性钙通道的基因表达异常可能是导致人类精子运动能力下降的原因之一,为人类弱精子症病因提供了新的研究方向.
