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中药封包外治法对雌兔膝关节软骨细胞的DNA氧化损伤及凋亡的影响
目的 观察中药封包外治法(温阳通络外治法)对雌兔膝关节骨关节炎模型软骨细胞的DNA氧化损伤及凋亡的影响,进而探讨其治疗的可能作用机制.方法 28只新西兰雌性兔随机等分为空白组、模型组、中药封包外治法组、玻璃酸钠组.除空白组外,其余雌兔均作卵巢去势处理.造模1周后,空白组和模型组不作任何处理;中药封包外治法组2次/d熨烫兔膝处,连用5周;玻璃酸钠组于右膝关节内注射玻璃酸钠注射液0.15 ml/kg,1次/周,连用5周;造模6周后分别进行雌二醇(E2)含量测定、DNA提取、8-羟基脱氧鸟甙检测、苏木精-伊红染色观察胫骨软骨形态,检测胫骨软骨细胞凋亡率,并做统计学处理.结果 雌兔E2水平测定空白组术前1周与术后1周、6周比较差异均无统计学意义(P>0.05),模型组、中药封包外治法组、玻璃酸钠组术前1周与术后1周、6周分别作比较差异均有统计学意义(P<0.05);造模12周后8-羟基脱氧鸟苷含量测定空白组与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05),模型组与中药封包外治法组比较,差异有统计学意义(P<0.05),模型组与玻璃酸钠组比较,差异有统计学意义(P<0.05),中药封包外治法组与玻璃酸钠组比较,差异无统计学意义(P>0.05),同时两组中8-羟基脱氧鸟苷含量比空白组、模型组明显降低;造模6周后取雌兔右膝关节内侧胫骨平台软骨组织,光镜下见空白组、模型组检测软骨组织有明显退行性变,而中药封包外治法组、玻璃酸钠组稍有退变;免疫组化观察胫骨平台软骨细胞凋亡率空白组与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05),模型组与中药封包外治法组比较,差异有统计学意义(P<0.05),模型组与玻璃酸钠组比较,差异有统计学意义(P<0.05),中药封包外治法组与玻璃酸钠组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 (1)本实验雌兔卵巢去势造模很成功.(2)中药封包外治法组与玻璃酸钠注射组对膝关节骨性关节炎都有效,且两者治疗效果无明显差异,可能对减轻氧自由基软骨细胞DNA损伤有一定的作用.(3)中药封包外治法组与玻璃酸钠注射组对软骨细胞凋亡有抑制作用,并且两者的治疗作用相当.
