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LKB1、ZEB1在胃癌组织中的表达及临床意义
目的 探讨LKB1、ZEB1蛋白在胃癌组织中的表达、临床意义及两者之间的相关性.方法 免疫组化法检测110例胃癌组织及25例胃良性病手术切除的组织标本中LKB1和ZEB1蛋白的表达情况.结果 110例胃癌组织标本中,LKB1阳性表达率29.1％(32/110),阴性表达率70.9％(78/110),阳性率明显低于胃良性病组织中的LKB1阳性率92％ (23/25),两者间差异有统计学意义(x2=33.4,P=0.00);ZEB1阳性表达率为80％ (88/110),阴性表达率为20％(22/110),阳性率显著高于胃良性病组织中的ZEB1阳性率16％(4/25)(x2=38.4,P=0.00).LKB1的表达与肿瘤分化程度、肿瘤浸润深度、是否有淋巴结转移、TNM分期、治疗后是否有远处转移相关(P值分别为0.000、0.026、0.001、0.002、0.024);ZEB1的表达与肿瘤分化程度、肿瘤浸润深度、是否有淋巴结转移、TNM分期、治疗后是否有远处转移相关(P值分别为0.000、0.001、0.027、0.000、0.027).胃癌患者癌组织LKB1高表达者ZEB1低表达,LKB1低表达者ZEB1高表达.结论 对胃癌患者,其肿瘤组织LKB1的阴性、ZEB1的阳性显示出较短的总生存期和无病生存期、较高的淋巴结转移率和远处转移率LKB1及ZEB1可能会影响胃癌患者的预后.在胃癌肿瘤组织中LKB1与ZEB1的表达呈负相关.
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LKB1基因转染对人肺腺癌细胞生物学行为的影响
目的:探讨外源性LKB1基因表达对人肺腺癌细胞生物学行为的影响.方法:应用巢式PCR方法扩增LKB1基因编码区,利用脂质体转染技术将真核表达重组体pcDNA-LKB1质粒和空载体pcDNA3.1质粒分别导入A549细胞,经G418筛选后获得稳定转染细胞克隆,Western blot检测LKB1和STAT3在A549细胞中的表达变化.通过绘制生长曲线和克隆形成试验检测获得性表达LKB1基因后肺癌细胞的增殖变化,流式细胞术(FCM)分析其细胞周期及其凋亡的变化.结果:成功获得了稳定表达外源性LKB1基因的A549细胞系,与转染空白载体组比较,转染LKB1基因的细胞生长速度明显减慢,细胞周期中G1/G0期比例明显增加,S期比例减少,细胞凋亡率升高;同时STAT3蛋白的磷酸化水平明显降低. 结论:LKB1可能通过下调STAT3蛋白磷酸化水平的表达从而抑制A549细胞的恶性生物学行为.
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EBSS饥饿人鼻咽癌CNE-2细胞株诱导自噬的机制研究
目的:观察饥饿状态下永生化正常鼻咽上皮NP69细胞、鼻咽癌CNE-2细胞的自噬变化及自噬与凋亡的相互作用,为Baf-Al在鼻咽癌中的应用前景提供证据.方法:EBSS溶液替代DMEM溶液在NP69和CNE-2细胞中制造体外饥饿环境,Baf-A1抑制细胞自噬.应用Western blot及透射电镜检测细胞自噬,MTT检测细胞存活率,qRT-PCR检测mRNA表达.结果:与NP69细胞相比,EBSS制造的饥饿环境显著促进CNE-2细胞发生自噬,处理24时后出现大量细胞凋亡,100 nmol/L Baf-Al抑制细胞自噬可延缓饥饿诱导的细胞凋亡.qRT-PCR检测结果:EBSS作用下,LKB1、AMPK、ULK1、Beclin1、ATG5 mRNA水平均显著上升(P＜0.05).结论:EBSS通过LKB1/AMPK/mTOR通路显著诱导CNE-2细胞自噬的发生.
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LKB1在急性白血病中的表达及临床意义
目的:研究LKB1(liver kinase B1)基因在不同类型急性白血病中的表达情况,探讨LKB1基因与急性白血病发生的相关性.方法:回顾性选取2016年6月至2017年6月初次诊断的急性白血病患者骨髓标本32例,同时选取非恶性血液系统疾病患者骨髓标本12例作为对照组.提取骨髓标本中单个核细胞,应用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测两组间患者LKB1基因表达情况,并分析其与患者年龄、性别及不同类型急性白血病的关系.结果:LKB1基因表达与年龄、性别无显著相关性.对照组12例中,有12例LKB1为阳性.根据疾病类型将白血病组分为3组:急性非淋巴细胞白血病组19例,其中LKB1阳性为9例,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);急性B淋巴细胞白血病组8例,其中LKB1阳性为3例,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);急性T淋巴细胞白血病组5例,其中LKB1阳性为5例,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).追踪患者治疗效果,提示LKB1+组的1疗程CR率及2疗程CR率均较LKB1-组高,且复发难治的患者比例较LKB1-组低.结论:LKB1基因在急性非淋巴细胞白血病及急性B淋巴细胞白血病的发生发展中起到了一定的作用,而急性T淋巴细胞白血病的发病机制可能与前两者不同.LKB1阴性可能提示预后不良.
