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电针对缺血性脑卒中再灌注损害大鼠 CREB 表达的影响
目的：探寻电针对缺血性脑卒中再灌注损害大鼠cAMP反应原件结合蛋白（ cAMP-response Element Binding Protein ， CREB）表达的影响。方法：将60只健康成年的SD大鼠驯养3 d随机分成假手术组、模型组以及电针组，每组各20只，使用线栓法大脑中动脉闭塞（ Middle Cerebral Artery Occlusion ，MCAO）对模型组、电针组大鼠进行脑缺血模型制作，缺血2 h后进行再灌注，电针组大鼠接受电针干预，再灌注3 d后将大鼠断头取脑，进行2，3，5-氯化三苯基四氮唑（2，3，5-triphenyltetrazolium chloride，TTC）染色以及图像软件分析观察脑梗死体积，免疫蛋白印迹法（Western blotting）检测CREB蛋白水平，聚合酶链反应（ Reverse Transcription-polymerase Chain Reaction ，PCR）检测CREB的基因表达水平。结果：TTC及其图像软件分析表明，电针组的SD大鼠脑梗死面积明显小于模型组（ P＜0.01）；电针组的SD大鼠CREB蛋白水平明显高于模型组（ P＜0.01）；电针组的SD大鼠CREB基因水平明显高于模型组（ P＜0.01）。结论：电针改善脑缺血再灌注损伤可以通过上调CREB实现。
关键词： 脑缺血 再灌注损伤 电针 cAMP反应原件结合蛋白 -
CREB和ERK1/2在CaMK Ⅱδ调控破骨细胞分化中的作用
目的 探索cAMP反应原件结合蛋白(CREB)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)在钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(CaMK Ⅱ)δ调控破骨细胞分化中的作用及分子机制.方法 构建CaMK Ⅱδ RNA干扰载体并转染小鼠RAW264.7细胞,确定其干扰效率.病毒转染细胞后,用50ng/ml核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导,于不同时间点检测CREB、ERK1/2蛋白磷酸化水平.应用ERK1/2信号阻断剂PD98059处理细胞,检测ERK1/2信号阻断对活化T细胞核因子c1(NFATc1)基因表达及破骨细胞分化的影响.结果 CaMK Ⅱδ干扰载体在mRNA和蛋白水平的干扰效率分别为77.2％和70.2％.CaMKⅡδ干扰可明显降低CREB、ERK1/2蛋白磷酸化水平,下调幅度分别为21％～55％和55％～64％.此外,ERK1/2信号阻断明显下调了NFATc1蛋白表达,使破骨细胞数目、骨吸收陷窝数目及面积分别下降了39.3％、50.0％和52.3％.结论 CaMK Ⅱδ RNA干扰可明显抑制CREB和ERK1/2蛋白磷酸化;CREB和ERK1/2参与了CaMK Ⅱδ对破骨细胞分化的调控.
