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脑脊液药理实验条件规范化初探——当归芍药散精简方的神经保护作用
目的:通过观察当归芍药散精简方(FBD)含药脑脊液对过氧化氢所致PC12细胞损伤模型的保护作用,对脑脊液药理实验条件规范化进行初步探讨.方法:以MTT法观察不同实验条件下(给药方案、添加量、处理方法、批次及保存时间),FBD大鼠含药脑脊液对过氧化氢损伤的PC12细胞存活率的影响.结果:过氧化氢损伤的PC12细胞存活率随FBD含药脑脊液添加量增加而提高;相同添加量多次给药(2次/d×3.5 d)含药脑脊液的保护率均高于单次给药的含药脑脊液;未处理含药脑脊液与经56℃、乙醇、丙酮处理含药脑脊液对PC12细胞均有显著的保护作用(P＜0.01),各组保护率无明显差异;同时观察到不同批次大鼠及不同保存时间的含药脑脊液对受损PC12细胞均有显著保护作用,但随保存时间的延长,其保护率下降.结论:含药脑脊液的制备可采用连续多次给药方案,无需灭活处理,一般以体外添加终体积的10%,-20℃冻存不超过30d为宜.
关键词： 脑脊液药理 当归芍药散精简方(FBD) 条件规范化 -
尼莫地平含药脑脊液对体外PC12细胞损伤的保护作用
目的 观察尼莫地平含药脑脊液对多种PC12细胞损伤模型的保护作用,对脑脊液药理实验条件的规范化及其应用进行探讨.方法 采用噻唑蓝(MTT)法,观察不同取样时间、不同添加量、不同灭活方法 处理的尼莫地平大鼠含药脑脊液对氯化钾损伤的PC12细胞存活力的影响,确定尼莫地平大鼠含药脑脊液的制备条件.并进一步考察该条件制备的尼莫地平大鼠含药脑脊液对过氧化氢、连二亚硫酸钠及谷氨酸钠等因素引起的PC12细胞损伤的保护作用.结果 尼莫地平含药脑脊液对氯化钾致PC12细胞损伤的保护率随添加量的增加而提高;相同添加量多次给药(2次-d-1×3.5 d)含药脑脊液的保护率均高于单次给药的含药脑脊液;热灭活、乙醇灭活及丙酮灭活含药脑脊液对PC12细胞均有显著保护作用,其保护率与未灭活含药脑脊液无显著性差异;根据确定条件制备的尼莫地平大鼠含药脑脊液对过氧化氢、连二亚硫酸钠及谷氨酸钠等因素损伤的PC12细胞均具有显著的保护作用.结论 尼莫地平含药脑脊液的制备以连续多次给药方案,无需灭活处理,体外添加终体积的10%为宜;对氯化钾等多种原因引起的PCI2细胞损伤均具有明显保护作用.
