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当归芍药散防治老年期痴呆的物质基础与作用机理研究Ⅵ--当归芍药散精简方含药脑脊液对PC12细胞的保护作用
目的:通过观察当归芍药散精简方(FBD)含药脑脊液对不同因素所致的PC12细胞损伤模型的保护作用,来探讨当归芍药散精简方(FBD)防治痴呆的作用机理.方法:以MTT法观察FBD含药脑脊液对谷氨酸、过氧化氢、连二亚硫酸钠和氯化钾造成的PC12细胞损伤模型中细胞存活率的影响.结果:连续多次给药(1.62g生药·kg-1)后0.5h～2.5h的FBD含药脑脊液对过氧化氢损伤的PC12细胞均有明显保护作用(P＜0.05～0.01),其中以1.5h的FBD含药脑脊液保护作用明显;该时间点FBD含药脑脊液对谷氨酸、连二亚硫酸钠和氯化钾造成的PC12细胞损伤模型亦有显著保护作用,且随脑脊液添加量增加保护率捉高.结论:FBD含药脑脊液对PC12细胞损伤有显著保护作用,其机制与抑制细胞内钙超载、对抗自由基的氧化损伤和谷氨酸的兴奋性毒性等有关.
关键词： 当归芍药散精简方(FBD) 脑脊液 PC12细胞 钙超载 -
脑脊液药理实验条件规范化初探——当归芍药散精简方的神经保护作用
目的:通过观察当归芍药散精简方(FBD)含药脑脊液对过氧化氢所致PC12细胞损伤模型的保护作用,对脑脊液药理实验条件规范化进行初步探讨.方法:以MTT法观察不同实验条件下(给药方案、添加量、处理方法、批次及保存时间),FBD大鼠含药脑脊液对过氧化氢损伤的PC12细胞存活率的影响.结果:过氧化氢损伤的PC12细胞存活率随FBD含药脑脊液添加量增加而提高;相同添加量多次给药(2次/d×3.5 d)含药脑脊液的保护率均高于单次给药的含药脑脊液;未处理含药脑脊液与经56℃、乙醇、丙酮处理含药脑脊液对PC12细胞均有显著的保护作用(P＜0.01),各组保护率无明显差异;同时观察到不同批次大鼠及不同保存时间的含药脑脊液对受损PC12细胞均有显著保护作用,但随保存时间的延长,其保护率下降.结论:含药脑脊液的制备可采用连续多次给药方案,无需灭活处理,一般以体外添加终体积的10%,-20℃冻存不超过30d为宜.
关键词： 脑脊液药理 当归芍药散精简方(FBD) 条件规范化 -
当归芍药散精简方CO2超临界萃取部位化学成分研究
目的:分离、鉴定并筛选FBD CO2超临界萃取部位防治血管性痴呆的有效成分.方法:硅胶柱层析法分离、纯化,FD-MS、1H-NMR、13CNMR鉴定化合物结构,并考察各化合物对氯化钾诱导PC12细胞钙超载损伤模型的影响.结果:从CO2超临界萃取部位共分离得到12个化合物,鉴定了其中9个,分别为白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、双白术内酯、levistolid A、茯苓酸、阿魏酸、β-谷甾醇和β-胡萝卜苷;其中,白术内酯Ⅲ能显著地改善氯化钾诱导PC12细胞钙超载损伤.结论:白术内酯Ⅲ可能是CO2超临界萃取部位防治血管性痴呆的有效成分.
