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肉桂醛对0℃冷应激大鼠背根神经节神经细胞胞浆内Ca2+变化及TRPA1和TRPM8mRNA表达的影响
目的:观察肉桂醛对0℃冷应激大鼠背根神经节神经细胞胞浆内Ca2浓度变化,并探讨其对瞬时受体电位通道蛋白A1(TRPA1)和M8(TRPM8) mRNA表达的影响.方法:取大鼠原代背根节神经细胞置于0℃冷应激状态,噻唑蓝(MTT)法检测不同时长冷应激状态下细胞的活性;加入肉桂醛,采用激光共聚焦显微镜观察细胞内外Ca2分布的变化;另以实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测其TRPA1,TRPM8 mRNA的表达.结果:不同时长的冷应激状态下,细胞存活度无明显差异;冷应激可降低背根神经节(DRG)神经细胞胞浆内Ca2浓度(P<0.05),一定量的肉桂醛则能使Ca2+浓度显著升高(P<0.01).Real-time PCR检测显示,长时间冷应激TRPA1 mRNA表达上调(P<0.05);长时间冷应激TRPM8 mRNA表达明显要高于短时冷应激(P<0.05);适当浓度的肉桂醛使冷应激大鼠DRG神经细胞TRPA1 mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01),对TRPM8 mRNA的影响尚不明显.结论:冷应激能影响TRPA1,TRPM8 mRNA的表达,降低胞浆内Ca2浓度,作用机制可能为肉桂醛通过活化TRPA1通道,升高细胞浆内Ca2浓度.
关键词: 冷应激 肉桂醛 背根神经节 Ca2+ 瞬时受体电位通道蛋白A1 瞬时受体电位通道蛋白M8