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HPLC测定灯心草中去氢厄弗酚含量
目的:建立灯心草中去氢厄弗酚含量的测定方法.方法:采用高效液相色谱法,Agilent HC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-水(65:35),流速1.0 mL· min-1,检测波长270 nm,柱温23℃.结果:去氢厄弗酚线性范围为0.017 4 ～0.870 4μg,与峰面积线性关系良好.平均加样回收率为98.3％,RSD 0.61％.结论:所建立的方法分离效果好、操作简便、准确、灵敏度高、重复性好,可用于灯心草中去氢厄弗酚的含量测定.
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灯心草药材RP-HPLC指纹图谱研究
目的:建立灯心草药材的RP-HPLC指纹图谱,探讨指纹图谱在灯心草质量评价方面的应用.方法:采用Agilent HC-C18为色谱柱,以甲醇-水为流动相梯度洗脱,检测波长为254nm,在40 min内获得灯心草药材的HPLC指纹图谱.采用国家药典委员会的中药色谱指纹图谱相似度评价系统生成对照指纹图谱,并进行相似度分析,结果:11批灯心草药材的指纹图谱包含16个共有峰,其中灯心草的生物活性成分去氢厄弗酚吸收峰的峰面积百分比为45.14%-67.86%.11批药材的指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均≥0.933.结论:市售灯心草药材的指纹图谱有很高的相似度,说明市售灯心草的化学成分有较高的均一性,HPLC指纹图谱可用于灯心草的质量评价.
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不同生长期灯心草皮部和髓部中去氢厄弗酚含量比较
目的:测定和比较两个产地不同生长时间灯心草皮部和髓部中去氢厄弗酚(DHE)的含量.方法:采用高效液相色谱(HPLC),Agilent Eclipse Plus-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-水(57∶43),流速1.0 mL· min-1,检测波长270 nm,柱温30℃.结果:灯心草髓部中DHE的含量均明显高于同期皮部;两产地灯心草髓部中去氢厄弗酚的含量,在生长后期差异增大;两产地各时期灯心草皮部中去氢厄弗酚的含量较低,但在灯心草全草中,皮部所含DHE量与髓部相当.结论:H省和J省灯心草中DHE含量差异较大.
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基于成分敲除技术辨识灯心草抗焦虑的主要有效成分
目的 明确灯心草Juncus effusus抗焦虑作用的主要有效成分.方法 利用硅胶柱色谱技术,对灯心草干燥茎髓部80％乙醇提取物的醋酸乙酯超声萃取粗提物中量较高的菲类成分去氢厄弗酚、厄弗酚、去氢灯心草酚、灯心草酚进行敲除,制备相应的菲类目标成分、目标成分阴性样品,将菲类目标成分、等比例的目标成分阴性样品和全成分分别进行小鼠高架十字迷宫试验.结果 菲类目标成分与全成分能明显提高小鼠进入开放臂的时间和次数,作用强度无差异,而目标成分阴性样品未表现出抗焦虑活性.结论 菲类成分为灯心草抗焦虑作用的主要有效成分,灯心草中与菲类成分共存的其他成分对其抗焦虑作用基本无影响.
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HPLC同时测定龙须草中2个菲类化合物的含量
目的 建立HPLC法测定龙须草中的厄弗酚和去氢厄弗酚含量.方法 采用色谱柱:Waterssymmetry C18(250 mm×4.6 mm,5μm);以甲醇(A)-0.1％甲酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;检测波长:260 nm;柱温:25℃.结果 厄弗酚进样量为1.92 ～ 48.00 μg(r=0.999 5)、去氢厄弗酚进样量为4.13 ～103.25μg(r=0.999 3)时线性关系良好,两者的平均回收率分别为100.06％(RSD =0.91％,n=6)、99.89％ (RSD=1.35％,n=6).结论 本方法简便、快速、准确,适用于厄弗酚和去氢厄弗酚的含量测定,为龙须草药材的质量评价提供依据.
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去氢厄弗酚在小鼠肝微粒体中代谢产物及CYP450酶亚型的鉴定
目的 建立去氢厄弗酚(DHE)小鼠体外肝微粒体孵育方法,鉴定DHE在小鼠肝微粒体中的代谢产物及参与DHE代谢的CYP450酶亚型.方法 采用UPLC-Q-TOF-MS/MS分析鉴定DHE在体外肝微粒体共温孵后的代谢产物,筛选7种CYP450酶亚型,并通过特异性化学抑制剂法,鉴别参与DHE代谢的主要CYP450酶亚型.结果 在体外肝微粒体共温孵后,检测到4个代谢产物;所筛选的7种CYP450酶亚型中,CYP1A2、CYP2C8和CYP2D2对DHE体外肝微粒体代谢的参与度较高.结论 在肝脏中,有多种代谢酶亚型参与DHE的代谢,表明DHE在临床上不易与其他药物产生相互作用.
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响应面法优化超声提取灯心草中去氢厄弗酚的工艺
目的：以甲醇为提取溶剂，用超声法从灯心草中提取去氢厄弗酚。方法以单因素实验为基础，分别考察超声提取时间、超声提取功率、甲醇体积分数对去氢厄弗酚提取率的影响，确定各因素的适宜水平。在此基础上，利用Box‐behnken中心组合设计法设计响应面分析甲醇体积分数、超声时间和超声功率3个因素对去氢厄弗酚提取率的影响，建立二次回归方程，分析佳提取工艺。结果灯心草中去氢厄弗酚超声提取的佳工艺为：甲醇体积分数为80．4％，超声时间为40 min ，超声功率为40％ P （P＝400 W），在此条件下，去氢厄弗酚提取量达到1．0030 mg · g －1。结论 Box‐behnken设计结合响应面分析法操作简单，可以更好地对灯心草中去氢厄弗酚的超声提取工艺进行优化。
