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致泻性大肠埃希菌诱发细胞肌动蛋白聚集的研究
人类重要的肠道致病菌,肠致病性大肠埃希菌(EPEC)和肠出血性大肠埃希菌(EHEC),在细菌黏附细胞周围形成肌动蛋白聚集的杯垫样结构来黏附并定植到肠道黏膜上,完成侵入宿主细胞的第一步.同时,被感染的肠道黏膜上皮细胞刷状缘脱落并失去微绒毛,这种特殊的病理损伤过程,称为黏附抹平效应(A/E效应).通过细胞培养感染模型对典型菌株的研究显示,尽管EHEC和EPEC都能激活下游N-WASP蛋白,Arp2/3蛋白,终引起有效肌动蛋白的聚集,但是它们却采取了不同的途径引起肌动蛋白的聚集.EPEC运用Tir-Nck途径,而EHEC运用是Tir-TccP途径来激活N-WASP蛋白.近通过细胞培养感染模型研究发现,EHEC和EPEC菌株存在一种既不依赖TccP也不依赖Nck但能引起微弱肌动蛋白聚集的途径.在体内实验(in vivo)和体外组织实验(ex vivo)中,黏膜组织感染也显示不依赖TecP或Nck同样能产生典型的A/E损伤.
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雪胆素乙通过破坏微丝结构和促进p21Cip1表达抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖
目的 分析雪胆素乙(CuⅡb)对人前列腺癌PC-3细胞增殖及细胞周期的影响,探讨其作用机制.方法 MTS法检测CuⅡb0.064～200μmol· L-1作用48 h后PC-3细胞增殖;CuⅡb2和20 μmol·L-1 作用24 h,相差显微镜观察细胞形态;CuⅡb2和20 μmol·L-1作用48 h,流式细胞术分析细胞周期分布;免疫荧光染色分析CuⅡb 20 μmol·L-1分别作用1,4和24h后微丝和微管细胞骨架变化;免疫印迹法测定CuⅡb20 μmol·L-1分别作用1,4和24 h后G肌动蛋白、F肌动蛋白、p21 Cip1及细胞周期蛋白A,B1,E和D1的表达.结果 CuⅡb以浓度依赖方式抑制PC-3细胞的增殖(r=0.9817,P＜0.05).CuⅡb 20 μmol·L-1作用48 h,使细胞周期阻滞于G2/M期,从溶剂对照组的(27.7±1.5)％上升为(45.3±1.8)％(P＜0.01),相差显微镜见细胞发生明显收缩.CuⅡb 20 μmol· L-1作用24 h,使G肌动蛋白水平显著下降,F肌动蛋白发生严重聚集(P＜0.05),而对微管只有轻微影响.与溶剂对照组相比,CuⅡb 20 μmol· L-1作用24 h后,细胞p21Cip1表达明显升高,细胞周期蛋白A表达显著下调,其他细胞周期蛋白表达上调(P＜0.05).结论 CuⅡb能明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的增殖,其机制可能是通过诱导肌动蛋白聚集,破坏微丝骨架,促进抑癌因子p21Cip1表达,阻滞细胞周期的进程.
