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人参皂苷对缺氧缺糖/再灌注神经干细胞增殖和分化的影响
目的:研究人参皂苷对体外氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)神经干细胞(NSCs)自我更新、增殖和分化的影响及其机制.方法:分离胎鼠海马神经干细胞,采用MTT法测定不同时间点人参皂苷对神经干细胞增殖分化的影响,并筛选出人参皂苷促进神经干细胞增殖分化的佳浓度和佳作用时间窗.建立神经干细胞缺氧缺糖/再灌注(OGD/R)的体外模型,并给予人参皂苷治疗,通过ELISA和Western blot方法检测培养液中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及细胞核中HIF-1 α蛋白的表达量.采用免疫荧光双标记方法检测各组神经干细胞特异性标志物巢蛋白(Nestin)、神经干细胞增殖标记物(Brdu)、神经元祖细胞特异性标记物(Tuj-1)及星形胶质细胞祖细胞标记物(Vimentin)的表达,统计各组阳性细胞的个数、面密度值和光密度值,研究验证人参皂苷对神经干细胞的增殖与分化的影响及可能的机制.结果:筛选出人参皂苷促进神经干细胞增殖分化的佳浓度为1μg/mL,作用的佳时间点为24h.结果发现,与正常组比较,模型组HIF-1 α蛋白和VEGF蛋白含量增加,阳性细胞的细胞个数、光密度和面密度减少,提示缺血再灌注后,导致了神经干细胞的损害,神经干细胞细胞核中HIF-1 α基因转录翻译增强,促进了其下游靶基因VEGF的转录翻译增强,使HIF-1 α蛋白与VEGF蛋白表达均增加,从而启动了神经干细胞增殖和分化的神经修复过程;与模型组比较,人参皂苷治疗组HIF-1 α蛋白和VEGF蛋白含量增加,且阳性细胞的细胞个数、光密度和面密度比模型组明显增加(P＜0.05).结论:人参皂苷可促进缺血再灌注后HIF-1 α蛋白和VEGF蛋白含量进一步增加,通过促进神经干细胞的增殖与分化而促进脑损伤结构和功能的修复.
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缺氧诱导因子HIF-1α与促凋亡蛋白BAK在胃癌中的表达及意义
目的 探讨HIF-1α和BAK蛋白在胃癌中的表达情况,以及二者在胃癌中的相互关系及作用.方法 应用免疫组化SABC染色法检测80例胃癌组织和20例正常胃组织中的HIF-1α和BAK蛋白的表达情况.结果 胃癌中HIF-1α和BAK蛋白的表达阳性率分别为56.3％ (45/80)和67.5％ (54/80),而在胃正常组织中分别为5.0％(1/20)和20.0％ (4/20),二者在胃癌中的表达显著高于胃正常组织,其差异有统计学意义(P＜0.05).HIF-1α蛋白表达与胃癌组织的浸润范围、分化程度及淋巴结转移有关(P＜0.05),与临床分期、年龄及性别无关(P＞0.05)；BAK蛋白表达与胃癌浸润及分化程度相关(P＜0.05),与淋巴结转移、临床分期、年龄及性别无关(P＞0.05).胃癌组织中HIF-1α与BAK蛋白的阳性表达之间呈正相关(列联系数r=0.056,P＜0.05).结论 HIF-1α与BAK蛋白在胃癌的临床分期及浸润转移中存在关系,这对于研究胃癌的发生和发展,以及对于探索以二者为靶点的抗肿瘤治疗有重要意义.
关键词： 缺氧诱导因子HIF-1α 促凋亡蛋白BAK 免疫组化 胃癌
