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海珠益肝加味方对慢性免疫性肝损伤小鼠LPS/TLR4信号途径的影响
目的:研究海珠益肝加味方对刀豆蛋白(ConA)诱导的慢性免疫肝损伤小鼠脂多糖/Toll样受体4(LPS/TLR4)信号途径的影响.方法:C57BL/6小鼠48只,随机均分为4组,空白对照组、模型组、甘草酸二铵组、海珠益肝加味方组,采用尾静脉ConA注射法复制模型.造模成功后,空白对照组、模型组予20mL/kg蒸馏水灌胃,甘草酸二铵组予甘草酸二铵0.68mg·kg-1·d-1灌胃,海珠益肝加味方组予海珠益肝加味方15.17g·kg-1·d-1灌胃.干预4周后,采集血清检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBiL);鲎试剂显色基质法测定脂多糖(LPS);ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6);Western Blot检测肝脏组织TLR4,MyD88,核因子-κB(NF-κB)蛋白表达.结果:与模型组比较,海珠益肝加味方组小鼠ALT、AST、TBiL水平显著下降(P<0.05,P<0.01);与模型组和甘草酸二铵组比较,海珠益肝加味方干预组LPS水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,海珠益肝加味方干预组TNF-α、IL-6水平均明显下降(P<0.05);与模型组和甘草酸二铵组比较,海珠益肝加味方组小鼠肝组织TLR4、MyD88、NF-κB的蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01).结论:海珠益肝加味方保护肝脏的作用机制与抑制TLR4-MyD88-NF-κB信号通路有关.
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清利活血健脾中药复方对慢性免疫性肝损伤模型小鼠细胞免疫功能的影响
目的:观察刀豆蛋白(ConA)诱导转基因小鼠慢性免疫性肝损伤肝组织细胞免疫功能情况,探讨清利活血健脾中药复方荣肝合剂对其的影响.方法:选用转基因小鼠62只,随机分为模型组、正常组、联苯双酯(DDB)组、茵陈组、茵陈蒿汤组、荣肝合剂组,除正常组外,其余5组采用ConA尾静脉注射的方法制备慢性肝损伤模型.各组均于开始造模的同时给予相应的药物或0.9%氯化钠溶液灌胃,每天1次,连续4周.末次给药后24h,取肝组织光镜下观察其病理变化,流式细胞仪检测CD:、CD;T细胞的表达情况.结果:病理组织学变化,与正常组比较,模型组肝组织结构被破坏,肝细胞变性坏死,成纤维细胞浸润,大量纤维组织增生,部分肝组织有假小叶形成.各脏器重量指数变化,各治疗组与模型组比较,肝脏指数均有显著性差异(P<0.05),其中荣肝合剂组、茵陈蒿汤组脾脏、胸腺指数也有明显变化(P<0.05).细胞免疫功能变化,与正常组比较,模型组CD4+所占比例显著性下降,CDs比例显著性升高(P<0.05,P<0.01),药物治疗后,CD4/CD8+的比例有所上升(P<0.05),其中荣肝合剂组优于其他治疗组(P<0.05).结论:中药复方对慢性免疫性肝损伤的病理损害有明显减轻的作用,其作用的一个方面可能与细胞免疫功能的调节密切相关.
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荣肝合剂对ConA诱导慢性免疫性肝损伤小鼠
目的 观察刀豆蛋白(ConA)诱导转基因小鼠慢性免疫性肝损伤肝组织淋巴细胞中Fasl和Bcl-2蛋白表达情况,探讨荣肝合剂对细胞凋亡的影响.方法 选用转基因小鼠74只,随机分为模型组、正常组、联苯双酯(DDB)组、菌陈组、菌陈蒿汤组、荣肝合剂组,分别灌胃给药4周.末次药后24 h,取肝组织光镜下观察其病理变化,TUNEL法检测细胞凋亡数,流式细胞仪检测肝组织T淋巴细胞中Fasl和Bcl-2蛋白表达.结果 病理组织学变化:与模型组比较,荣肝合剂组及菌陈蒿汤组肝组织纤维增生及细胞坏死较轻(P<0.05);凋亡指数及相关基因蛋白的表达:与正常组比较,模型组的凋亡指数及凋亡基因Fasl蛋白表达显著增高(P<0.05),而凋亡抑制基因Bcl-2蛋白表达无显著变化(P>0.05);与模型组比较,荣肝合剂组及菌陈蒿汤组凋亡指数减少(P<0.01),并且两组的Fasl表达水平显著下降(P<0.05),Bcl-2表达水平明显升高(P<0.01);与菌陈蒿汤组比较,荣肝合剂组在凋亡指数及Fasl和Bcl-2蛋白表达方面差异无统计学意义(P>0.05),而与菌陈组和联苯双酯组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 中药复方(荣肝合剂和菌陈蒿汤)不仅可减轻肝组织的病理损害,还可能通过对Fasl和Bcl-2表达的调节,减少慢性免疫性肝损伤小鼠细胞凋亡.
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甘草酸二铵磷脂复合物对小鼠慢性肝损伤的保护作用
目的:探讨甘草酸二铵磷脂复合物注射剂(DG-PC)对C_(57)BL/6J小鼠慢性免疫性肝脏损害的保护作用.方法:复制C_(57)BL/6J小鼠慢性免疫性肝脏损害模型,测定血清ALT、AST、蛋白和透明质酸(HA),肝匀浆中超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、Ⅰ型胶原(C.I),并对肝脏组织切片进行电镜观察.结果:DG-PC可以明显改善肝损小鼠AST水平、提高白蛋白(ALB)含量、升高白球比(A/G)、降低HA含量(P<0.01),提高肝损小鼠的SOD和GSH水平(P<0.01),治疗效果优于甘草酸二铵(DG).小鼠肝组织透射电镜观察显示DG-PC可以保护肝细胞和细胞器,减轻纤维化程度.结论:DG-PC对于C_(57)BL/6J小鼠慢性免疫性肝损伤均具有一定的保护作用,可能与抗氧化等活性有关.
关键词: 甘草酸二铵磷脂复合物 慢性免疫性肝损伤 超微结构