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甘草次酸在大鼠体内药动学的RP-HPLC研究
目的:建立大鼠血浆中甘草次酸浓度的高效液相测定方法,探讨甘草次酸在大鼠体内的药动学过程.方法:大鼠按1.0 mg·kg-1尾静脉注射甘草次酸后0.08,0.17,0.25,0.33,0.5,0.75,1,2,3,4,6 h眼底采血,乙腈沉淀血浆,HPLC测定血浆中甘草次酸浓度,以DAS软件拟合药动学参数.结果:甘草次酸血药浓度在50～2 000 ng·mL-1线性良好,r=0.999 7,测得低中高浓度回收率分别为(105.2±2.23)％,(102.5±2.95)％,(98.4±2.32)％,日内、日间低中高浓度RSD均小于4％.甘草次酸在大鼠体内药-时曲线符合二室开放模型,主要药动学参数为:t1/2α=(0.153±0.023)h,t1/2β=(2.365±0.866)h,Cmax=(2.074±0.100)mg·L-1,CL=(0.715±0.082)L·h-1·kg-1,Vd=(2.427±0.872)L·kg-1,AUC0-6h=(1.302±0.151)mg·h-1·L-1.结论:建立的RP-HPLC适用于体内甘草次酸的含量测定及药代动力学研究,甘草次酸在体内的分布迅速、广泛.
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四种检测法在乙腈沉淀法去除血清蛋白中的比较
目的 比较四种方法在乙腈沉淀法去除血清蛋白中的检测效果,建立一种能快速检测去蛋白率的方法.方法 用乙腈沉淀法去除血清蛋白,分别应用四种不同的检测分析方法,方法Ⅰ通过真空冻干;方法Ⅱ通过真空干燥;方法Ⅲ通过设立对照调零;方法Ⅳ通过挥干乙腈,分析血清蛋白的去除率.结果 方法Ⅰ和方法Ⅱ耗时长、设备要求高;方法Ⅲ耗时短、方法简便;方法Ⅳ耗时较短、但容易产生实验误差,方法Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ的蛋白去除率结果比较,差异无统计学意义(P > 0.05),与方法Ⅳ比较,差异有统计学意义(P < 0.05).结论 方法Ⅲ为佳的分析测定分析方法,可用于快速方便了解乙腈的去蛋白率.
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去除血清中高、中丰度蛋白方法的优化
目的:通过比较和优化血清样品制备方法,建立简便、灵敏的去除血清中高、中丰度蛋白的方法.方法:运用盐析法、有机溶剂法和亲和层析柱法去除血清中高、中丰度蛋白,经蛋白浓度测定和SDS-PAGE电泳分析,比较3种方法对高、中丰度蛋白去除效果及小分子蛋白的保留和分布情况.结果:乙腈沉淀法能去除血清样品中90%左右的高、中丰度蛋白,同时可残留更多15 ku以下的小分子蛋白;盐析沉淀法和亲和层析柱法均能去除血清样品中大部分高、中丰度蛋白,但所得的15 ku以下的小分子蛋白少于乙腈沉淀法所得到的相应蛋白.结论:用1.2倍体积乙腈沉淀法处理血清样品可去除绝大部分高、中丰度蛋白,同时收获更多的15 ku以下的小分子量蛋白.
