首页 > 文献资料
-
泰山白花丹参提取物对H2O2诱导的人脐血内皮祖细胞损伤的保护作用及机制
目的:研究泰山白花丹参提取物对过氧化氢(H202)诱导的人脐血内皮祖细胞(EPCs)氧化应激损伤的保护作用及机制.方法:通过密度梯度离心分离人脐血单个核细胞,EBM-2完全培养基诱导分化培养EPCs.以0.001％H2O2诱导EPCs损伤,以泰山白花丹参提取物干预,以eNOS抑制剂L-NMMA定位泰山白花丹参对EPCs的作用靶位.通过光镜观察细胞形态,以四甲基偶氮噻唑蓝比色法检测细胞活力,用流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡变化,取各实验组上清行丙二醛(MDA)含量检测.结果:EPCs受到氧化损伤后,细胞活力明显降低,细胞凋亡明显增加,上清MDA含量明显增加,加入白花丹参提取物可明显改善上述结果,而1 mmol·L-1 L-NMMA+0.6 g·L-1白花丹参制剂+H2O2处理组与H2O2组比较细胞活力和细胞凋亡率都没有显著差异.结论:泰山白花丹参提取物对H2O2损伤后内皮祖细胞有显著保护作用,eNOS抑制剂L-NMMA能抵消这种保护作用,说明泰山白花丹参可能是通过eNOS途径对EPCs氧化应激损伤起保护作用(eNOS是白花丹参的作用靶点之一).
-
脐血内皮祖细胞治疗糖尿病大鼠下肢缺血的实验研究
目的 研究脐血内皮祖细胞(EPC)治疗糖尿病下肢缺血的有效性及机制,为临床治疗糖尿病足病(DF)提供理论依据. 方法 取产妇足月产脐血分离单核细胞,培养7d,流式细胞仪鉴定细胞,并计数活细胞数.将Wistar雄性大鼠分成3组:(1)糖尿病大鼠射线照射后结扎双后肢股动脉,尾静脉注射血管EPC(DE组).(2)糖尿病大鼠结扎双后肢股动脉,尾静脉注射缓冲液(DP组).(3)正常大鼠射线照射后结扎双后肢,尾静脉注射EPC(NC组).用绿色荧光(GFP)示踪EPC,Ⅷ因子免疫组化检测肌纤维间毛细血管数,RT-PCR检测双后肢肌肉血管内皮生长因子(VEGF) mRNA水平. 结果 DE、NC组右后肢腓肠肌溃疡及缺血明显好转,有明显荧光,肌纤维间毛细血管数多,VEGF表达高,DP组好转不明显,无荧光,毛细血管数少,VEGF表达少,其差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 脐血EPC治疗糖尿病大鼠下肢缺血有效.
-
脐血内皮祖细胞尾静脉与局部注射治疗糖尿病下肢缺血
背景:内皮祖细胞治疗糖尿病下肢缺血临床及动物实验多采用局部肌肉注射.目的:比较脐血内皮祖细胞鼠尾静脉与局部注射治疗糖尿病下肢缺血效果的差异.方法:取Wistar雄性大鼠分成5组:①糖尿病射线照射后结扎双后肢股动脉,尾静脉注射内皮祖细胞(DLV).②糖尿病结扎双后肢股动脉左后肢局部肌肉注射PBS(DLC),右后肢局部肌肉注射内皮祖细胞(DLM).③正常大鼠射线照射后结扎双后肢,尾静脉注射内皮祖细胞(NLV).④糖尿病不结扎不注射内皮祖细胞(DC).用绿色荧光示踪内皮祖细胞,苏木精-伊红染色检测肌纤维间毛细血管数,RT-PCR检测双后肢肌肉血管内皮生长因子mRNA水平.结果与结论:DLV组与DLM组比较,右后肢腓肠肌溃疡及缺血好转明显,二者无明显区别;有明显荧光,差别不明显,Ⅷ因子免疫组织化学染色肌纤维间毛细血管数多,相互间无明显差别;腓肠肌血管内皮生长因子表达差异无显著性意义(P > 0.05).提示脐血内皮祖细胞治疗糖尿病大鼠下肢缺血尾静脉注射与局部肌肉注射效果相当.
